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新冠假病毒及突变株



S蛋白重组假病毒(Pseudovirus)是一类重组改造反转录病毒,能够整合其他病毒囊膜糖蛋白来形成的具有外源性病毒囊膜,但仍保持着自身基因组特性。SARS-Cov-2 S蛋白假病毒具有良好的生物安全性和稳定性等优点,不需要P3 (BSL-3)实验室安全条件下操作活病毒, 已被广泛应用到疫苗研发、抗体中和研究、模拟病毒侵染细胞功能实、,检测试剂盒阳性参照等。

派真生物采用三质粒包装系统制备了早期新冠病毒、英国突变体、D614G突变体、南非突变体、巴西突变体等新冠S蛋白重组假病毒现货产品。利用优化的载体设计保留Spike蛋白在假病毒衣壳外的区域(与ACE2受体识别并结合),而非全长结构,适用于新冠抗体药物、疫苗筛选和药效研究。

产品列表:

产品编号 产品名称 产品说明 产品规格
LV-nCov2-A SARS-COV-2_del19AA-GFP Pseudoviron 新冠病毒(截短版)+GFP标记  1ml
LV-nCov2-B SARS-COV-2 (GB variant:B.1.1.7)_del19AA-GFP Pseudoviron 新冠病毒英国突变体(B.1.1.7)截短版+GFP标记  1ml
LV-nCov2-C SARS-COV-2 (D614G variant)_del19AA-GFP Pseudoviron 新冠病毒D614G突变体(截短版)+GFP标记  1ml
LV-nCov2-D SARS-COV-2 (SA variant: B.1.351)_del19AA-GFP Pseudoviron 新冠病再南非突变体(B.1.351)截短版+GFP标记  1ml
LV-nCov2-E SARS-COV-2 (BZ variant: P.1)_del19AA-GFP Pseudoviron 新冠病毒印度突变体(B.1.617)截短版+GFP标记  1ml
LV-nCov2-F SARS-COV-2 (India Variant: B.1.617(L452R, E484Q,D614G,P681R)- del19AA-GFP Pseudoviron 新冠病毒巴西突变体(P.1)截短版+GFP标记  1ml
LV-nCov2-G SARS-COV-2 (India Variant: B.1.617.2(T19R, 156del,157del, R158G, L452R, T478K, D614G, P681R,D950N)-del19AA-GFP Pseudoviron 新冠病毒印度突变体(B.1.617.2)截短版+GFP标记  1ml
LV-nCov2-H SARS-COV-2 (India Variant: B.1.617.l(L452R, E484Q,P681R,D614G, Q1071H)-del19AA-GFP Pseudoviron 新冠病毒印度突变体(B.1.617.1)截短版+GFP标记  1ml
LV-nCov2-I SARS-COV-2 (India Variant: (B.1.618)(/1145-146,E484K,D614G)-del19AA-GFP Pseudoviron 新冠病毒印度突变体(B.1.618)截短版+GFP标记  1ml
LV-nCov2-J SARS-COV-2(Omicron variant: B.1.1.529)_del19AA-GFP Pseudovirus 新冠病毒奥密克戎突变体(B.1.1.529)截短版+GFP标记 1ml
LV-2163 Lv-2163 pLV.CMV.EGFP.WPRE,≥ lE+7 TU/ml GFP假病毒对照(VSVG包膜)  1ml

  服务优势 

  • 感染滴度≥5E+6 TU/mL;
  • hACE2细胞感染效率高,96孔板10-20µL假病毒感染派真生物hACE2293T细胞(约1.5×104个细胞/孔),感染率达到80%以上;
  • 提供EGFP标记,适于荧光直观分析;
  • 不具备致病性,安全可靠;
  • 无需P3/BSL-3实验室,P2/BSL-2环境即可进行实验;
  • 每批次都有完整质量检测报告,包括感染滴度数据、293T/hACE2感染图片或荧光素酶表达量结果。
假病毒体外感染



建议采用感染ACE2表达丰度比较高的贴壁细胞株进行感染实验(例如:派真生物hACE2 293T细胞株),以96孔板为例进行目的细胞感染实验,如有必要可用2%FBS的培养基稀释病毒原液。

  • 第一天,准备细胞:

96孔板接种若干孔细胞,每孔接种约1×104个细胞,每孔培养基体积100ul;进行病毒感染时,细胞融合度大约30-50%。

  • 第二天,准备病毒并感染细胞:

-80°C冰箱取出病毒先在冰上融化或者4°C融化,根据算好加入的病毒量稀释到培养基中,以派真生物的hACE2 293T细胞为例,将病毒用2%FBS的DMEM (pH7.0~7.4)稀释, 例如10µL的假病毒加入80µL的2%FBS的DMEM, 将弃去96孔板中90µL体积的原培养基,加入稀释好的病毒液,此即为感染后0吧h;

  • 更换培养基:

一般感染8-20h后将含有病毒的培养液更换为新鲜培养基;感染后注意观察细胞状态,如果假病毒感染对细胞有明显的毒性而影响到细胞状态,则建议在加入病毒4-6h后,更换新鲜培养基。

  • 感染效率检测:

一般感染48-72小时(推荐感染后72h),在倒置荧光显微镜下观察荧光,估计病毒感染目的细胞的效率;

96孔板感染72h (10或20ul假病毒感染)


96孔板感染72h (10或20ul假病毒感染)

温馨提示:

本实验用的DMEM培养基pH不得超过7.4,即目测颜色应为桃红色,以保障感染效率。

根据感染效率结果,确定最适的假病毒感染用量;再开始正式的药物筛选实验。