AAV（腺相关病毒）反复冻融确实会产生不利影响，主要体现在以下几个方面：
1. 病毒滴度降低
每次冻融过程会导致AAV病毒滴度降低约10%左右。这是因为冻融过程会对病毒的蛋白质外壳和基因组DNA造成损伤，降低其完整性和感染能力。
2. 基因组DNA泄漏
研究发现，反复冻融会导致AAV病毒颗粒中的基因组DNA泄漏，表现为游离单链DNA（ssDNA）的显著增加。这种泄漏会进一步降低病毒的转导效率。
3. 转导效率下降
反复冻融会降低AAV的转导效率，即病毒将外源基因导入宿主细胞的能力会减弱。这可能与病毒外壳的损伤和基因组DNA的完整性受损有关。
4. 病毒颗粒降解
冻融过程中，AAV病毒颗粒可能会发生降解，导致其物理和化学性质发生变化。这种降解会影响病毒的稳定性和功能。
5. 稳定性降低
AAV病毒在反复冻融后，其整体稳定性会下降，尤其是在极端温度条件下（如高温或低温）。这可能需要额外的保护措施（如添加稳定剂）来维持其活性。
建议：
1.尽量避免反复冻融：为了避免反复冻融对AAV的影响，建议在收到病毒后按照每次使用量进行分装，并保存于-80℃。如果需要稀释，应在冰浴中融化后进行操作，并尽快使用。
2.验证感染效率：如果AAV已经经历了多次冻融，建议通过qPCR、感染实验或ELISA等手段检测其滴度或生物学活性。
关于派真
作为一家专注于AAV 技术十余年，深耕基因治疗领域的CRO&CDMO，派真生物可提供从载体设计、构建到 AAV、慢病毒和 mRNA 服务的一站式解决方案。凭借深厚的技术实力、卓越的运营管理和高标准的服务交付，我们为全球客户提供一站式CMC解决方案，包括从早期概念验证、成药性评估到IIT、IND及BLA的各个阶段。
凭借我们独立知识产权的π-alphaTM 293 细胞AAV高产技术平台，我们能将AAV产量提高多至10倍，每批次产量可达1×10¹⁷vg，以满足多样化的商业化和临床项目需求。此外，我们定制化的mRNA和脂质纳米颗粒（LNP）产品及服务覆盖药物和疫苗开发的各个阶段，从研发到符合GMP的生产，提供端到端的一站式解决方案。
