AAV病毒能在-80℃保存多久?

2025年8月29日
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AAV(腺相关病毒)相比慢病毒要稳定得多,保存条件对其滴度影响相对较小。

1. 短期保存

  • 4℃ 下,AAV 可以稳定保存 1–2 周,适合短期使用。

  • 但超过这个时间容易出现感染力下降。

2. 长期保存(−80℃)

  • −80℃ 冷冻保存 时,AAV 基本可以保持 数月至数年 的稳定性。
  • 很多文献和病毒包装公司说明书都提到,−80℃ 下 至少 1–2 年 滴度和感染力几乎没有明显下降。
  • 有实验室报告使用 5 年以上的 AAV 仍然有良好活性,但推荐在 1–2 年内使用以保证实验稳定性。

若采用更优的保存策略,AAV 的 – 80℃保存时间可延长至2 年以上,甚至 5 年

  • 高质量纯化:病毒载体需通过超速离心、层析等方法高度纯化,去除杂质(如细胞碎片等),减少保存过程中的非特异性降解;
  • 避光与密封:AAV 对光照(尤其是紫外光)敏感,需用避光管(如棕色 EP 管)分装,并密封防止缓冲液挥发导致浓度变化;
  • 定期质控:长期保存中,建议每 6-12 个月抽样检测病毒滴度(如 qPCR 测基因组滴度、细胞感染实验测功能滴度),确保活性未显著下降。

3. 影响稳定性的因素

  • 冻融循环:反复冻融会导致病毒颗粒聚集或降解,是影响滴度的主要原因。建议一次分装成小量,避免多次冻融。

  • 缓冲液:含缓冲液可增加冻存稳定性。

  • 冻存容器:低吸附管有助于减少病毒颗粒吸附在管壁上。

建议:

  • 短期实验(<2 周):4℃ 保存即可。

  • 中长期保存(数月–数年):−80℃ 冷冻保存,避免反复冻融。

  • 分装保存:小体积冻存,单次使用,减少冻融循环。

  • 尽量 1–2 年内使用,超过 2 年最好先做滴度验证。

 

关于派真

作为一家专注于AAV 技术十余年,深耕基因治疗领域的CRO&CDMO,派真生物可提供从载体设计、构建到 AAV、慢病毒和 mRNA 服务的一站式解决方案。凭借深厚的技术实力、卓越的运营管理和高标准的服务交付,我们为全球客户提供一站式CMC解决方案,包括从早期概念验证、成药性评估到IITINDBLA的各个阶段。

 

凭借我们独立知识产权的π-alphaTM 293 细胞AAV高产技术平台,我们能将AAV产量提高多至10倍,每批次产量可达1×10¹⁷vg,以满足多样化的商业化和临床项目需求。此外,我们定制化的mRNA和脂质纳米颗粒(LNP)产品及服务覆盖药物和疫苗开发的各个阶段,从研发到符合GMP的生产,提供端到端的一站式解决方案。

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