一般情况下,慢病毒(Lentivirus)转染后 48~72 小时左右可以看到荧光信号。但具体时间会受到多个因素影响:
一、常见时间范围
| 时间点 | 细胞状态 | 说明 |
| 24 小时 | 多数情况下还看不到明显荧光 | 病毒进入细胞但尚未充分表达 |
| 48 小时 | 部分细胞开始出现荧光 | 表达启动,但信号可能较弱 |
| 72 小时 | 荧光清晰、稳定 | 表达基本达到峰值,可用于分析 |
| >96 小时 | 荧光进一步增强或趋于稳定 | 若整合型载体,可长期稳定表达 |
二、影响荧光出现时间的因素
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病毒滴度(感染效率):滴度高则转导快,荧光出现早。
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细胞类型:分裂活跃的细胞一般较快出现荧光;原代或缓慢分裂细胞则较慢。
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启动子强度:如 CMV 启动子表达较快,EF1α、UbC 稍慢但更稳定。
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荧光蛋白特性:EGFP 成熟快,mCherry、tdTomato 等红色荧光蛋白成熟略慢。
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感染条件:是否加聚凝胺(Polybrene)、MOI(感染复数)大小、培养环境等。
建议
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观察时间点:建议在 48 h、72 h、96 h 各拍一次荧光图像。
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若 72 h 仍无荧光,应检查:病毒滴度是否低、感染条件是否不当、荧光显微镜参数是否正确等。
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