AAV(腺相关病毒)从 -80 °C取出时的推荐融化方式如下:
AAV病毒正确的融化(解冻)条件
1. 最推荐:冰上融化(on ice)
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将冻存管从 -80 °C 取出后,立即放在冰上缓慢融化(通常需要 5–10 分钟)。
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融化后轻轻吹打混匀即可使用。
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优点:对病毒最温和,保持最高滴度。
2. 可选方式:室温快速融化(RT)
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如果需要较快解冻,可以放在 室温(20–25 °C) 融化 1–2 分钟。
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融化后立即转回冰上,避免长时间置于室温。
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注意:室温时间越短越好,避免蛋白结构不稳定造成滴度降低。
3. 不推荐:37 °C融化
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37 °C 会加速 AAV 衣壳蛋白的降解,不建议用于解冻。
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只有非常特殊、紧急情况下才会使用,且要极短时间(<30 秒)。
❗ AAV融化时的注意事项
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避免反复冻融:每一次冻融可能造成滴度下降 20–30%。建议分装(aliquot)。
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融化后全程保持在冰上,用多少取多少。
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不要剧烈涡旋(vortex),会损伤衣壳结构。
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避免长时间暴露在室温。
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