aav带荧光标签

2025年12月3日
分享:

AAV(腺相关病毒)可以非常方便地携带荧光标签基因,用于观察感染效率、体内定位、筛选阳性细胞等。

1.AAV常携带的荧光基因

常见荧光蛋白包括:

  • GFP / EGFP(绿色)

  • ZsGreen(更亮、更稳定的绿色)

  • mCherry(红色)

  • tdTomato(强亮度红色双体)

  • EYFP(黄色)

  • CFP(青色)

  • mScarlet(高亮红色)

  • far-red 类荧光蛋白 如 mKate2、iRFP(适合体内成像)

选择时考虑:亮度、稳定性、光漂白耐受性、体内成像深度。

2.AAV荧光标签的常用表达方式

(1) 直接表达(强启动子驱动)

例:CAG-GFP、CMV-EGFP、EF1α-GFP
优点:亮,表达强
缺点:可能影响组织特异性,某些组织 CMV 可能沉默

(2) Cre/Lox 系统荧光示踪

如:AAV-Cre + Rosa26-LSL-GFP 小鼠
用于条件性标记、示踪特定细胞群。

3.AAV带荧光的常见应用场景

应用 描述
感染效率监测 观察细胞/组织中 GFP 表达情况,评估滴度有效性
细胞示踪 长期观察特定细胞群迁移、分化
神经环路示踪 AAV-ChR2–EYFP、AAV-hSyn-GFP 等常用于神经科学
体内成像 红/远红荧光用于深层组织成像
阳性细胞分选 FACS 直接分选 GFP+/mCherry+ 细胞

4.注意事项

(1) 插入基因长度限制

AAV 的包装能力约 4.7 kb

(2) 启动子的选择影响荧光强度

  • 强启动子:CMV、CAG → 亮度高

  • 神经元:hSyn、CamKII

  • 肝脏:TBG(TBG-GFP 常用于肝脏特异表达)

  • 心脏:cTnT

(3) 荧光出现时间

AAV 感染后一般在:

  • 24–48 h:出现弱荧光

  • 3–7 天:荧光明显

  • 2–3 周:体内达到峰值

关于派真

作为一家专注于AAV 技术十余年,深耕基因治疗领域的CRO&CDMO,派真生物可提供从载体设计、构建到 AAV、慢病毒和 mRNA 服务的一站式解决方案。凭借深厚的技术实力、卓越的运营管理和高标准的服务交付,我们为全球客户提供一站式CMC解决方案,包括从早期概念验证、成药性评估到IITINDBLA的各个阶段。

 

凭借我们独立知识产权的π-alphaTM 293 细胞AAV高产技术平台,我们能将AAV产量提高多至10倍,每批次产量可达1×10¹⁷vg,以满足多样化的商业化和临床项目需求。此外,我们定制化的mRNA和脂质纳米颗粒(LNP)产品及服务覆盖药物和疫苗开发的各个阶段,从研发到符合GMP的生产,提供端到端的一站式解决方案。

下载

用户登录

还没账号? 请注册
手机验证码登录
账号密码登录
手机号码*
验证码*
忘记密码?

首次使用手机号登录将自动为您注册

登录即代表阅读并接受《注册协议》 《用户协议》

新用户注册

已有账号?
手机注册
邮箱注册
手机号码*
验证码*
机构名称*
客户类型*

重置密码

手机找回密码
邮箱找回密码
手机号码*
验证码*
设置新密码*
确认新密码*