AAV 介导的敲低（Knockdown）与敲除（Knockout）有什么区别？

在基因功能研究和基因治疗研发中，AAV 常被用于介导基因敲低（Knockdown, KD）或基因敲除（Knockout, KO）。
二者在作用机制、效果强度及适用场景上存在显著差异。

一、基本概念对比

二、作用机制不同

1. AAV 介导的敲低（Knockdown）

常见方式包括：

• shRNA / miRNA / siRNA 表达

• 抑制 mRNA 稳定性或翻译过程

特点：

• 不改变基因组 DNA 序列

• 表达水平通常降低 50–90%（与设计和体系相关）

2. AAV 介导的敲除（Knockout）

常见方式包括：

• CRISPR/Cas9 + sgRNA

• 引入 DNA 双链断裂，导致移码突变或功能缺失

特点：

• 直接作用于基因组

• 敲除效果稳定、持久

三、效果强度与稳定性

敲低（KD）

• 表达抑制程度可调
• 更接近“功能削弱”状态
• 适合研究剂量依赖或部分功能缺失

敲除（KO）

• 基因功能完全丧失
• 表型更明显
• 更适合研究基因的“必需性”

四、适用场景差异

更适合选择 AAV 敲低的情况

• 目标基因是必需基因

• 完全敲除会导致细胞死亡或严重表型

• 需要模拟疾病中的部分功能缺失

更适合选择 AAV 敲除的情况

• 需要明确判断基因是否“必须”

• 研究基因功能的终极作用

• 构建稳定、长期的体内模型

五、安全性与复杂度对比

六、FAQ 快速判断指南

Q：如果不确定敲除会不会“太猛”，怎么办？
A：建议先使用 AAV 敲低评估基因功能，再决定是否进行敲除。

Q：体内实验更常用哪种？
A：早期功能验证常用敲低，明确靶点后再考虑敲除策略。