AAV 包装周期一般多久?哪些因素会影响时间

2026年1月16日
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AAV(腺相关病毒)是一种广泛用于基因功能研究和基因治疗研究的递送工具。很多科研用户在委托 AAV 包装服务时,最关心的问题之一就是项目周期需要多久

一、AAV 包装的标准周期

在不涉及特殊设计或反复优化的情况下,AAV 包装的整体周期通常为 2–4 周

典型流程与耗时参考

阶段 内容说明 参考耗时
载体质粒准备 客户提供质粒或基因序列 6-12天
病毒包装 HEK293 细胞三质粒共转染
病毒收获与纯化 裂解、柱纯化或梯度纯化
滴度检测 qPCR / ddPCR / ELISA
质量控制与发货 无菌、内毒素、封装率(可选)

  • 周期: 1×10¹³ vg以内,极速模式快至6个自然日
  • 常规科研级 AAV:11个自然日起
  • 高滴度或多项质控项目:约 3–4 周

二、影响 AAV 包装周期的主要因素

1. 是否已有可用表达载体

  • 客户直接提供合格的 AAV 质粒:周期最短

  • 需要从头构建载体(克隆、测序):增加 1–2 周

  • 载体设计复杂或构建失败需返工:周期进一步延长

2. 目的基因长度(Insert Size)

插入片段大小 对周期的影响
≤4.5 kb 常规情况
接近 4.7 kb 上限 包装效率降低,可能需优化
>4.7 kb 需 Dual AAV 方案,周期明显延长

3. AAV 血清型选择

常用血清型(AAV2 / 5 / 8 / 9):流程成熟、周期稳定

特殊或工程化血清型(如 AAV-DJ、PHP.eB):

  • 表达和滴度波动较大
  • 可能需要重复包装

4. 目标滴度要求

常规科研滴度(~10¹² vg):标准周期

高滴度(≥10¹³ vg/ml):

  • 需要放大培养
  • 可能合并多批病毒

5. 纯化方式与质控等级

标准科研级:柱纯化 + 滴度检测

高质量科研级:

  • 梯度纯化
  • 空壳率、内毒素、无菌检测
  • 整体周期增加 3–5 天

三、不同项目类型的周期参考

项目类型 预计周期
客户自带质粒 + 常规血清型 1-2 周
含载体构建项目 2–4 周
Dual AAV 或大基因项目 4–6 周
高滴度 + 全面质控 约 4 周

四、缩短 AAV 包装周期的建议

  • 提前确认 ITR 完整性与序列正确性

  • 合理控制插入片段长度(建议 ≤4.5 kb)

  • 明确最低可接受滴度范围

  • 时间紧张项目可提前沟通并行方案

关于派真

作为一家专注于AAV 技术十余年,深耕基因治疗领域的CRO&CDMO,派真生物可提供从载体设计、构建到 AAV、慢病毒和 mRNA 服务的一站式解决方案。凭借深厚的技术实力、卓越的运营管理和高标准的服务交付,我们为全球客户提供一站式CMC解决方案,包括从早期概念验证、成药性评估到IITINDBLA的各个阶段。

 

凭借我们独立知识产权的π-alphaTM 293 细胞AAV高产技术平台,我们能将AAV产量提高多至10倍,每批次产量可达1×10¹⁷vg,以满足多样化的商业化和临床项目需求。此外,我们定制化的mRNA和脂质纳米颗粒(LNP)产品及服务覆盖药物和疫苗开发的各个阶段,从研发到符合GMP的生产,提供端到端的一站式解决方案。

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