过表达基因慢病毒的对照组怎么表示

2026年1月16日
分享:

在慢病毒过表达实验中,对照组的设计非常关键。合理设置对照组可以区分目的基因的效应与病毒感染或载体本身的非特异性影响。常用对照组及其表示方式如下:

1. 过表达组(Experimental Group)

  • 表示方式:OE-Gene

  • 示例:OE-Bcl2(表示过表达 Bcl2 的慢病毒)

  • 作用:表达目的基因,用于评估过表达对细胞功能的影响。

2. 空载体对照(Empty Vector Control)

  • 表示方式:Vector / EV(Empty Vector)

  • 示例:pLV-Vector(使用与实验组相同的载体骨架,但不含目的基因)

  • 作用:排除载体本身(如启动子、荧光标记、抗性基因)对细胞的潜在影响,是过表达实验中最核心的对照组。

3. 未处理对照(Untreated Control / Mock)

  • 表示方式:Untreated / Mock

  • 示例:不接触病毒的细胞

  • 作用:排除病毒感染过程(如多聚阳离子 Polybrene 的使用、感染步骤、胰酶消化等)对细胞的非特异性影响。

4. 荧光蛋白对照(仅当载体带标记时)

  • 表示方式:GFP / mCherry

  • 示例:pLV-GFP(使用空载体,将目的基因替换为荧光蛋白)

  • 作用:排除荧光蛋白本身对细胞功能的影响,同时保持载体结构一致。

5. 内源性对照(Endogenous / Wild-type)

  • 表示方式:WT / Parental

  • 作用:用于比较过表达后与细胞内源基因水平的差异,通常通过 qPCR 或 Western blot 验证。

  • 注意:在大多数过表达实验中,内源性对照不是必需的单独对照组,而是作为表达水平参考。

对照组设置示例表格

组别 病毒类型 标注符号 备注
过表达组 目的基因慢病毒 OE-Gene 例:OE-Bcl2
空载体对照 空载体慢病毒 Vector / EV 例:pLV-Vector
未处理组 无病毒处理 Mock / Untreated 排除操作影响
荧光蛋白对照 空载体带荧光标记 GFP / mCherry 例:pLV-GFP,仅当载体带荧光标记时

注意事项

  1. 病毒匹配:对照病毒应与实验病毒完全一致(载体骨架、启动子、荧光标记、抗性基因)。

  2. MOI 一致性:实验组与对照组的感染复数(MOI)必须相同。

  3. 验证实验:需通过 qPCR 或 Western blot 确认过表达效率,对照组应不表达目的基因。

  4. 优先级:空载体对照(Vector / EV)是最核心的对照组,建议优先采用;未处理组和荧光蛋白对照可根据实验需求补充。

关于派真

作为一家专注于AAV 技术十余年,深耕基因治疗领域的CRO&CDMO,派真生物可提供从载体设计、构建到 AAV、慢病毒和 mRNA 服务的一站式解决方案。凭借深厚的技术实力、卓越的运营管理和高标准的服务交付,我们为全球客户提供一站式CMC解决方案,包括从早期概念验证、成药性评估到IITINDBLA的各个阶段。

 

凭借我们独立知识产权的π-alphaTM 293 细胞AAV高产技术平台,我们能将AAV产量提高多至10倍,每批次产量可达1×10¹⁷vg,以满足多样化的商业化和临床项目需求。此外,我们定制化的mRNA和脂质纳米颗粒(LNP)产品及服务覆盖药物和疫苗开发的各个阶段,从研发到符合GMP的生产,提供端到端的一站式解决方案。

下载

用户登录

还没账号? 请注册
手机验证码登录
账号密码登录
手机号码*
验证码*
忘记密码?

首次使用手机号登录将自动为您注册

登录即代表阅读并接受《注册协议》 《用户协议》

新用户注册

已有账号?
手机注册
邮箱注册
手机号码*
验证码*
机构名称*
客户类型*

重置密码

手机找回密码
邮箱找回密码
手机号码*
验证码*
设置新密码*
确认新密码*