AAV一般用于基因敲除还是过表达？（客户FAQ）

Q：AAV病毒通常用于基因敲除（Knockout）还是过表达（Overexpression）？

A：AAV最常见的用途是基因过表达，同时也可用于基因敲低；若要实现基因敲除，通常需要结合CRISPR系统。

一、AAV最常见用途：基因过表达

AAV是一种高效、安全性较高的基因递送工具，在进入细胞后多以游离形式存在，能够长期稳定表达外源基因。

典型应用包括：

• 外源基因过表达（cDNA表达）

• 荧光蛋白表达（GFP / mCherry 等）

• 功能验证实验

• 动物体内表达模型构建

• 基因治疗研究

因此，在科研和临床前研究中，AAV最常用于“过表达”研究。

二、AAV可以用于基因敲低（Knockdown）

AAV可通过表达：

• shRNA

• miRNA

来抑制目标基因表达。

特点：

• 表达持续时间长

• 适合体内研究

• 属于表达抑制（不是完全消除）

常用于神经科学、肿瘤研究和功能验证实验。

三、AAV能否直接实现基因敲除（Knockout）？

AAV本身不具备基因编辑功能，不能直接实现基因敲除。

如果需要敲除基因，通常采用：

• AAV递送CRISPR/Cas9系统

• AAV递送sgRNA（配合Cas9转基因动物）

需要注意：

• AAV包装容量约为4.7 kb

• SpCas9体积较大，可能存在容量限制

• 可选择SaCas9或分体Cas9方案

因此，AAV实现“敲除”依赖于CRISPR系统，而非AAV本身功能。