腺相关病毒(AAV)滴度检测方法

2024年3月18日
分享:

腺相关病毒(AAV)是一种常用于基因传递和基因治疗的载体。在研究和应用中,准确测定AAV的滴度至关重要。滴度检测方法的选择直接影响着实验结果的准确性和基因治疗的效果。本文将介绍几种常见的AAV滴度检测方法,以及它们的优缺点。

1. PCR法

PCR法是一种常见的AAV滴度检测方法。该方法通过测定AAV样品中的DNA含量来确定其滴度。PCR法具有快速、高灵敏度和高通量的特点,适用于大批量样品的检测。但是,PCR法无法区分有效的AAV粒子和无效的残余DNA,可能会导致滴度的过高估计。

2. 蛋白质含量法

蛋白质含量法是一种常用的间接滴度检测方法。该方法通过测定AAV样品中的蛋白质含量来估算其滴度。蛋白质含量法简单易行,适用于大多数实验室条件。然而,蛋白质含量法无法区分功能性AAV粒子和非功能性粒子,可能会导致滴度的低估计。

3. 灭活滴度法

灭活滴度法是一种直接测定AAV功能性粒子数量的方法。该方法利用AAV感染细胞并检测其表达的目的基因来确定滴度。灭活滴度法直接反映了AAV粒子的功能性,因此通常被认为是最可靠的滴度检测方法之一。然而,该方法的操作较为复杂,需要耗费较长的时间。

4. 确定感染单位(IU)

确定感染单位(IU)是一种常用的AAV滴度单位,通常用于评估AAV样品的活性。IU是指AAV样品中引起目标细胞感染的有效粒子数量。确定IU需要进行细胞培养和目标基因的表达分析,是一种比较准确的滴度评估方法。然而,确定IU的过程较为繁琐,需要较长的实验周期。

在选择AAV滴度检测方法时,需要综合考虑实验目的、样品特性和实验条件等因素。不同的检测方法各有优缺点,研究人员应根据具体情况选择合适的方法,以确保实验结果的准确性和可靠性。

关于派真

作为一家专注于AAV 技术十余年,深耕基因治疗领域的CRO&CDMO,派真生物可提供从载体设计、构建到 AAV、慢病毒和 mRNA 服务的一站式解决方案。凭借深厚的技术实力、卓越的运营管理和高标准的服务交付,我们为全球客户提供一站式CMC解决方案,包括从早期概念验证、成药性评估到IITINDBLA的各个阶段。

 

凭借我们独立知识产权的π-alphaTM 293 细胞AAV高产技术平台,我们能将AAV产量提高多至10倍,每批次产量可达1×10¹⁷vg,以满足多样化的商业化和临床项目需求。此外,我们定制化的mRNA和脂质纳米颗粒(LNP)产品及服务覆盖药物和疫苗开发的各个阶段,从研发到符合GMP的生产,提供端到端的一站式解决方案。

下载

用户登录

还没账号? 请注册
手机验证码登录
账号密码登录
手机号码*
验证码*
忘记密码?

首次使用手机号登录将自动为您注册

登录即代表阅读并接受《注册协议》 《用户协议》

新用户注册

已有账号?
手机注册
邮箱注册
手机号码*
验证码*
机构名称*
客户类型*

重置密码

手机找回密码
邮箱找回密码
手机号码*
验证码*
设置新密码*
确认新密码*