腺相关病毒包装技术解析

2024年3月21日
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腺相关病毒是一种非致病性的小型病毒,其基因组为单链DNA。AAV的包装过程主要分为以下几个步骤:

构建AAV质粒: AAV的包装始于构建包含所需基因的AAV质粒。这一质粒通常包括AAV基因组的两个终端反转重复序列(ITRs),以及待传递的基因序列。在质粒的构建中,通常还包括适当的调控序列,如启动子和终止子,以确保基因的适当表达。

转染细胞: 构建好的AAV质粒被转染至包装细胞中。常用的包装细胞包括HEK293细胞系,这些细胞对于AAV的复制和包装具有较高的效率。

提取AAV颗粒: 经过转染后,AAV基因组和包装蛋白在包装细胞内组装成完整的AAV颗粒。随后,通过细胞破裂和纯化步骤,可以从细胞提取出纯净的AAV颗粒。

质控检测: 提取得到的AAV颗粒需要进行质控检测,以确保其质量符合要求。常用的检测方法包括PCR、免疫印迹、电镜观察等,这些方法可以验证AAV颗粒的完整性、纯度和活性。

获得纯化的AAV: 经过质控检测后,可以获得高纯度、高活性的AAV颗粒,用于进一步的基因传递研究或临床应用。

腺相关病毒包装技术的应用

腺相关病毒包装技术在基因治疗和生物医学研究中具有广泛的应用:

基因治疗: 腺相关病毒被广泛用于基因治疗,可用于治疗各种遗传性疾病、癌症和神经系统疾病等。通过将治疗基因载入AAV颗粒进行传递,可以实现基因的精准传递和表达,从而修复或替代受损的基因,达到治疗目的。

生物医学研究: AAV包装技术也被广泛应用于生物医学研究领域。科研人员可以利用AAV颗粒将感兴趣的基因序列导入细胞或动物模型中,用于研究基因功能、疾病机制等方面的问题。

基因转导工具: 除了基因治疗和研究外,腺相关病毒包装技术还被用作基因转导工具。研究人员可以利用AAV颗粒将荧光标记基因、报告基因等导入目标细胞中,用于追踪细胞命运、标记特定细胞类型等应用。

总的来说,腺相关病毒包装技术为基因治疗和生物医学研究提供了重要的工具和平台。随着对AAV包装技术的不断改进和优化,相信其在未来将有更广阔的应用前景,为人类健康事业作出更大的贡献。

关于派真

作为一家专注于AAV 技术十余年,深耕基因治疗领域的CRO&CDMO,派真生物可提供从载体设计、构建到 AAV、慢病毒和 mRNA 服务的一站式解决方案。凭借深厚的技术实力、卓越的运营管理和高标准的服务交付,我们为全球客户提供一站式CMC解决方案,包括从早期概念验证、成药性评估到IITINDBLA的各个阶段。

 

凭借我们独立知识产权的π-alphaTM 293 细胞AAV高产技术平台,我们能将AAV产量提高多至10倍,每批次产量可达1×10¹⁷vg,以满足多样化的商业化和临床项目需求。此外,我们定制化的mRNA和脂质纳米颗粒(LNP)产品及服务覆盖药物和疫苗开发的各个阶段,从研发到符合GMP的生产,提供端到端的一站式解决方案。

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