AAV包装纯化浓缩方法探究

2024年3月4日
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腺相关病毒(AAV)在基因治疗和基因传递领域中展现出了巨大的潜力。然而,为了实现其有效的应用,需要高效、可靠的包装、纯化和浓缩方法。本文将探讨一些当前流行的AAV包装纯化浓缩方法,并评估它们的优缺点。

超声波法

超声波法是一种常见的AAV浓缩方法。这种方法利用超声波将AAV粒子从溶液中聚集,然后通过离心将其分离出来。虽然这种方法简单易行,但可能会对AAV粒子造成损伤,导致病毒颗粒的失活和降解。

密度梯度离心法

密度梯度离心法是一种常用的AAV纯化方法,通过在离心过程中利用不同密度的梯度将目标分子分离出来。虽然这种方法可以有效地去除杂质,但是纯化过程复杂,且易造成病毒颗粒损伤和丢失。

亲和层析法

亲和层析法利用AAV粒子与特定配体之间的亲和性进行分离,例如利用病毒外壳蛋白与特定抗体之间的结合来实现。这种方法具有高度选择性和纯度,但是需要定制化的配体,且成本较高。

质量流式分析法

质量流式分析法结合了光学密度梯度离心和流式细胞仪技术,可以实现对AAV粒子的快速、高效、准确的浓缩和纯化。这种方法操作简便,不易造成病毒损伤,但需要专业的设备和操作技能。

电泳法

电泳法利用电场将AAV粒子移动到离心管底部,然后通过离心将其分离出来。这种方法简单易行,但可能会导致AAV颗粒的损伤和丢失,且纯化效果不如其他方法理想。

结论

不同的AAV包装纯化浓缩方法各有优缺点,选择合适的方法取决于实验的具体要求、设备的可用性和操作者的技能水平。未来的研究应该致力于开发更加高效、稳定和成本低廉的AAV纯化浓缩方法,以促进AAV在基因治疗和基因传递领域的广泛应用。

关于派真

作为一家专注于AAV 技术十余年,深耕基因治疗领域的CRO&CDMO,派真生物可提供从载体设计、构建到 AAV、慢病毒和 mRNA 服务的一站式解决方案。凭借深厚的技术实力、卓越的运营管理和高标准的服务交付,我们为全球客户提供一站式CMC解决方案,包括从早期概念验证、成药性评估到IITINDBLA的各个阶段。

 

凭借我们独立知识产权的π-alphaTM 293 细胞AAV高产技术平台,我们能将AAV产量提高多至10倍,每批次产量可达1×10¹⁷vg,以满足多样化的商业化和临床项目需求。此外,我们定制化的mRNA和脂质纳米颗粒(LNP)产品及服务覆盖药物和疫苗开发的各个阶段,从研发到符合GMP的生产,提供端到端的一站式解决方案。

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