慢病毒包装质粒是构建慢病毒载体系统中用于生成慢病毒颗粒的关键组件。常见的慢病毒包装系统包括一系列质粒,每种质粒负责提供不同的病毒蛋白和元件以确保病毒的组装和包装。典型的慢病毒包装质粒种类如下:
包装质粒(Packaging Plasmid)
包含慢病毒的主要结构蛋白和酶,例如gag、pol、rev等基因。这些基因对于病毒的装配和逆转录功能至关重要。包装质粒不含env基因,以增强病毒的安全性,防止自我复制。
包膜质粒(Envelope Plasmid)
提供病毒的包膜蛋白,最常用的是VSV-G(水疱性口炎病毒G蛋白),其具有广泛的宿主范围,可使慢病毒感染多种细胞类型。VSV-G质粒通过pseudotyping改变病毒包膜特性,以适应不同研究需求。
转移质粒(Transfer Plasmid)
含有目标基因、启动子和标记基因(如GFP或荧光蛋白),以及必要的长末端重复序列(LTR)和包装信号(ψ序列),用于将外源基因整合到宿主基因组中。这是主要载体,用于转染所需基因。
辅助质粒(Auxiliary Plasmids)
某些系统中还可能使用其他辅助质粒来增强包装效率和稳定性,特别是如果包装的慢病毒较为复杂或载体系统定制化程度较高。
常见的慢病毒系统,如二代和三代慢病毒系统,其质粒种类略有不同。三代系统多采用4质粒系统,以提高生物安全性和分离包装基因的作用。