慢病毒包装稳转293T（Stable Transfection of 293T Cells for Lentivirus Production）是一个常见的实验方法，用于产生慢病毒。293T细胞是一种常用的宿主细胞，能够高效地转染，并广泛用于病毒载体的生产，包括慢病毒。
慢病毒包装通常包括几个步骤：
1.慢病毒包装质粒的选择：
需要选择合适的慢病毒包装质粒，通常包括三个主要组件：
- 表达质粒：携带目的基因的表达载体。
- 包装质粒：提供病毒所需的核心蛋白（如gag、pol、rev等）。
- 包膜质粒：提供病毒包膜蛋白（如VSV-G），帮助病毒感染宿主细胞。
2.293T细胞转染：
使用脂质体或电转的方法将上述包装质粒转染到293T细胞中。
转染后，细胞开始表达病毒蛋白，并组装成病毒颗粒。
3.病毒收集：
转染后的细胞会在48小时内分泌病毒颗粒。通过培养基收集这些病毒颗粒，通常在48小时和72小时收集两次。
4.病毒浓缩（可选）：
为了提高病毒滴度，可以对病毒进行浓缩，使用超速离心或聚乙烯醇（PEG）沉淀法等技术。
5.病毒滴度检测：
利用qPCR或流式细胞术等方法对收集到的病毒样本进行滴度检测，确定病毒的感染效率。
6.慢病毒感染：
将收集到的病毒颗粒用于转导其他细胞，进行基因过表达或基因敲除实验。
这种方法的优势在于慢病毒的高转导效率和能够感染分裂与非分裂细胞的特点，广泛应用于基因治疗、基因功能研究等领域。