慢病毒上清在4℃保存时,需要注意以下几个保存条件:
1.短期保存:如果在短时间内(一周内)使用慢病毒,可以将病毒置于4℃保存。建议在一周内使用完毕,以保持病毒滴度和活性。
2.避免反复冻融:反复冻融会降低病毒滴度,每次冻融可能会降低病毒滴度10%-50%。因此,应尽量避免反复冻融,并根据每次实验用量进行分装。
3。稀释后的保存:如果需要稀释病毒,稀释后建议在4℃保存,并尽量在3天内使用完毕以保证病毒滴度。
4.分装建议:为了减少反复冻融的影响,建议将病毒分装成小体积(如200 μL/tube)后保存于-80℃。
5.使用前的准备:使用慢病毒前,应将病毒从-80℃冰箱中取出,进行冰浴融化。
6.病毒操作安全:在生物安全柜(BL-2级别)内进行所有慢病毒的操作,确保生物安全柜运行正常并定期检测其性能。
7.废弃物处理:病毒相关的废弃物需要特殊收集,统一经高温灭菌处理。
8.个人防护:操作病毒时请穿实验服,佩戴口罩和手套,尽量不要裸露双手及手臂的皮肤。
遵循上述保存条件和方法,可以最大限度地保持慢病毒的活性和滴度,从而确保实验的成功进行。