什么是三质粒包装系统

三质粒包装系统是一种常见的病毒载体生产系统，特别是在生产慢病毒（Lentivirus）和腺相关病毒（AAV）载体时经常使用。它利用三种不同的质粒分别表达所需的病毒元件，目的是在实验室条件下安全、高效地生产病毒颗粒。

主要组成部分：

1.包装质粒（Packaging Plasmid）
包含病毒的关键结构和功能蛋白基因（如逆转录病毒的gag和pol基因）。这些基因负责病毒颗粒的组装和功能性，但不包括病毒的复制和传播能力，以增强安全性。

2.包膜质粒（Envelope Plasmid）
编码病毒的包膜蛋白，例如慢病毒生产中常用的VSV-G蛋白。这些蛋白决定了病毒的宿主范围（即感染特定细胞类型的能力）。

3.转移质粒（Transfer Plasmid）
包含目的基因（插入的外源基因）和病毒的长末端重复序列（LTRs）。这些LTR序列允许目的基因被整合到目标细胞的基因组中。

工作原理：

1.将这三种质粒共同转染到宿主细胞（通常是HEK293T细胞）。

2.宿主细胞将根据质粒信息表达病毒颗粒所需的所有组分。

3.病毒颗粒被组装后释放到培养基中，可通过后续步骤收集和浓缩。

优势：

安全性：由于基因分布在三个质粒上，减少了意外重组生成复制型病毒的风险。

灵活性：可以使用不同的包膜质粒调节病毒的宿主范围。

高效性：能够有效生产大量高滴度的病毒颗粒。

应用：

三质粒包装系统广泛应用于基因治疗、基因功能研究等领域。