HEK293细胞在AAV包装过程中具有几个特殊作用:
1.高效转染:HEK293细胞(特别是衍生的293T细胞)具有高转染效率,这对于AAV的生产至关重要。它们能够同时接收多个质粒,包括载体质粒、辅助质粒和包装质粒,确保AAV基因组、衣壳蛋白和辅助蛋白的共同表达。
2.提供辅助蛋白表达:AAV的复制和包装过程需要某些辅助蛋白来支持,这些蛋白通常由腺病毒提供。在AAV生产中,HEK293细胞通过辅助质粒提供腺病毒的辅助基因,如E1A、E1B、E2A、VA RNA等,这些基因的表达产物能够有效支持AAV基因组的复制和转录过程。
3.AAV颗粒的组装和包装:HEK293细胞不仅支持AAV基因组的复制,还表达AAV的衣壳蛋白(VP1、VP2、VP3)。这些衣壳蛋白按特定比例组装形成AAV的外壳,并将AAV基因组封装在这些外壳中,形成完整的AAV颗粒。
4.天然表达腺病毒的E1基因:HEK293细胞天然表达腺病毒的E1基因,有助于辅助病毒功能的提供,这对于AAV的复制和包装是有益的。
5.大规模培养的适用性:HEK293细胞适合大规模培养,这对于工业生产重组AAV(rAAV)颗粒非常关键。
HEK293细胞在AAV包装过程中扮演了重要的角色,不仅提供了高效的转染平台,还提供了必要的辅助蛋白,并参与了AAV颗粒的组装和包装。
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