腺相关病毒（Adeno-associated virus，AAV）属于细小病毒科，Dependoparvovirus属，病毒表面由衣壳蛋白VP1，VP2，VP3总共60拷贝，按1：1：10比例组成的二十面体结构，无包膜，直径约26nm。衣壳蛋白的不同突变型产生了不同的AAV亚型，按血清试验结果可以分为不同血清型，目前已有超过10种AAV血清型（AAV1～AAV10)。
AAV是目前发现一类结构最简单的、无包膜的单链DNA病毒，病毒基因组长约有4.7Kb。基因组的两端是两个T形反向末端重复序列(ITR)，主要用作病毒复制起点和包装信号。中间编码区有2个开放阅读框，其中Rep基因编码病毒复制所需的四种蛋白质：Rep78、Rep68、Rep52和Rep40（以其分子量命名）。Cap基因通过来自不同起始密码子的可变剪接和翻译编码三个衣壳亚基。AAV自身不能复制，必须依赖于其它病毒复制，比如腺病毒、疱疹病毒、杆状病毒，有超过80%的人携带AAV，未发现AAV与任何疾病相关。
制备腺相关病毒（AAV）载体通常需要一系列实验步骤和技术，以下是一般的制备过程概述：
1、构建载体质粒：首先，需要设计和构建一个含有要传递的目的基因以及必要的调控元件（如启动子、终止子等）的质粒。这个质粒将被用作AAV载体的基础。在构建质粒时，需要将编码目的基因的序列插入到AAV基因组的编码区域，同时保留AAV基因组两端的反向末端重复序列（ITR)。
2、表达CAP和REP蛋白：CAP和REP蛋白在AAV的生命周期中起关键作用，参与病毒组装、包装和复制。需要构建一个表达CAP和REP蛋白的质粒，以便在制备过程中提供这些蛋白。
3、共转染细胞：通常使用三质粒共转染法，将含有AAV载体基因组的质粒、表达CAP和REP蛋白的质粒以及腺病毒共基因质粒一同转染到细胞中。这样，CAP和REP蛋白将协助AAV载体的复制和包装。
4、病毒提取：在适当的时间点，收集转染细胞培养液，并进行细胞破裂和病毒颗粒提取。这些病毒颗粒含有目的基因，可以用于后续的基因递送实验。
5、病毒纯化：从细胞提取物中纯化AAV颗粒，通常采用离心、密度梯度离心等技术来分离和富集AAV病毒颗粒。
6、病毒滴度测定：测定病毒颗粒的滴度，即单位体积中含有多少个感染性AAV颗粒。这将帮助在后续实验中确定合适的病毒用量。
AAV载体优势
1、高安全性和极低免疫原性
野生型AAV是天然缺陷型病毒，重组AAV不整合基因组，未发现与任何疾病相关，极低免疫原性。
2、感染宿主范围广
AAV具有广泛的细胞感染能力,可以感染分裂细胞和非分裂细胞。
3、高组织嗜性
AAV有多种血清型，每种血清型能够特异性感染不同的组织或器官。
4、感染扩散能力强、特异性强
AAV具体体积小、滴度高等特点，在体内具有较强的感染扩散能力，并具有较高的组织特异性。
5、体内表达时间长
高滴度的AAV可在体内长期稳定表达。