研究背景
研究方法
AAV因其高效、低免疫原性和广泛的组织特异性，成为基因治疗中的重要工具。在这项研究中，研究团队使用重组AAV9（rAAV9）载体将人类tau蛋白基因引入恒河猴（Macaca mulatta）的海马体，通过一系列行为学测试和脑组织分析，评估AD样病理的形成情况。结果显示，AAV介导的tau蛋白过表达不仅导致了神经元内tau蛋白聚集，还诱发了类似AD患者的大脑病理变化，成功地再现了阿尔茨海默病样病理特征。
研究结果
结果1：脑立体定位将AAV注射至双侧海马体获得tau持续高表达的NHP模型
图 1 通过立体定向注射过表达hTau蛋白的AAV载体，使用免疫显色及PET/MRI成像等多种检测方法，检测结果显示AAV介导的基因转导效率约为75%，且在6至50周内保持稳定，表明AAV能够有效诱导tau蛋白的广泛且持久的表达。
结果2：AAV诱导的NHP海马体中存在tau蛋白异构体累积，并形成神经原纤维缠结
图 2 在hTau过表达6周和50周后，3R和4R tau阳性神经元的数量显著增加，且磷酸化tau蛋白在神经元中的表达显著上升，形成了神经原纤维缠结（NFTs）。
图 3 AAV介导的hTau过表达引起了显著的神经变性和神经元丧失，结果显示NeuN+细胞数量显著减少，神经元数量减少，海马区的葡萄糖代谢下降，表明神经元正在退化或死亡。
图 4 hTau过表达后12周内海马体积显著缩小，并通过MRI和组织切片观察到这种变化，脑脊液中神经丝轻链（NfL）浓度显著升高，这些也说明神经元发生了退化。
图 5 AAV介导的hTau过表达10周后，GFAP+和Iba1+细胞数量显著增加，表明星形胶质细胞和小胶质细胞从静息状态转变为反应状态，导致局部神经炎症反应。
图 6 过表达hTau会引发多种血管异常和损伤，包括血管基底膜增厚、血管形态异常、血管退化和破裂，以及星形胶质细胞末端从血管上撤退。这些变化导致血管结构显著受损甚至解体，表明tau过表达能够诱导与阿尔茨海默病相关的血管异常和损伤。
结论4：tau过表达导致的学习和记忆障碍
图 7 hTau过表达导致猴子空间工作记忆恶化和联想学习能力受损。实验设计包括基于WGTA的空间工作记忆测试和延迟匹配样本测试，结果显示hTau过表达显著使猴子的记忆保持时间减少30-40%，学习周期延长50-80%。
意义与展望
这项研究不仅为阿尔茨海默病的研究提供了新的灵长类动物模型，还展示了AAV在基因治疗和疾病模型构建中的巨大潜力。AAV载体的使用，使得基因能够在目标区域内高效表达，科学家们可以更精准地研究AD的病理机制，为未来的治疗策略开发提供坚实基础。派真CRO &CTDMO 一站式服务平台，提供从基因合成、载体构建，到病毒包装的整体解决方案，全面支持您的基因治疗研究。我们还提供高质量NHP级别AAV载体产品，助力阿尔茨海默疾病的基因治疗研究，帮助研究人员在NHP研究中降低安全风险，提高疗效，并获得更可靠和可重复的研究数据。