慢病毒使用前解冻的步骤如下:
1.准备解冻环境:
(1)确保实验环境无菌,使用生物安全柜操作,避免病毒污染和外部污染。
(2)准备好病毒存储管、无菌移液器等必要的器材。
2.取出慢病毒:
(1)从液氮罐或-80°C冰箱中取出慢病毒管。
(2)尽量减少病毒离开低温环境的时间,迅速将病毒放入冰浴或手中轻轻温暖。
3.解冻慢病毒:
(1)将慢病毒管放在冰上,或置于4°C冰箱中缓慢解冻,避免温度骤变导致病毒失活。
(2)如果需要快速解冻,也可将病毒管放入37°C水浴中(注意:37°C水浴时间不要超过1-2分钟,并且管口保持密闭,避免污染)。
4.轻轻混匀:
解冻后,轻轻混匀病毒溶液,避免剧烈震荡以防病毒颗粒失活。
5.后续处理:
根据实验需求,直接使用解冻的病毒感染细胞,或将未用完的病毒重新分装并放回-80°C保存(避免频繁冻融,建议分装成单次使用量)。
注意事项:
避免反复冻融,因为这会显著降低病毒效价。
解冻后尽量在当天使用,确保病毒活性最佳。
严格按照生物安全规定操作。