慢病毒包装出毒量很低的原因可能与以下几个方面有关，可以逐一排查：
1. 质粒质量
质粒浓度与纯度：质粒的质量是影响病毒滴度的关键因素。如果质粒被污染（如蛋白、RNA 或内毒素过多），会影响细胞转染效率，导致病毒滴度低。
质粒配比：包装系统中质粒的摩尔比例（例如载体质粒与包装质粒的比例）需要准确。
2. 转染效率
转染试剂选择：使用低效的转染试剂会导致质粒不能有效进入细胞。建议选择高效的转染试剂。
细胞状态：转染细胞的状态对病毒生产至关重要。例如，HEK293T细胞应处于良好增殖状态（对数生长期），并且细胞融合度控制在 70%-90%。
3. 包装细胞状态
细胞类型：不同的 HEK293 系细胞株（如 HEK293T、HEK293FT）可能会有不同的出毒效率，优先使用 HEK293T 细胞。
细胞状态：细胞过度融合、污染（如细菌、支原体）或代次过高都会显著降低病毒滴度。
4. 培养条件
培养基选择：使用高质量的培养基，并且避免使用抗生素，以免影响病毒颗粒生成。
培养环境：CO₂ 浓度、温度和湿度应保持稳定，通常为 37℃、5% CO₂。
收毒时间：一般在转染后 48-72 小时收集病毒液，过早或过晚都会影响病毒滴度。
5. 病毒载体本身
载体设计：载体中插入的目的基因如果过长或毒性较强，会显著降低病毒滴度。
启动子选择：目的基因的启动子（如 CMV、EF1α 等）对病毒的转录效率也有影响。
6. 病毒收集与浓缩
病毒收集方法：收集上清时要避免过度扰动细胞。收集后需立即离心去除细胞碎片，并建议过滤（0.45 μm 滤膜）。
病毒浓缩：病毒浓缩（如超速离心或 PEG 沉淀）可以提高滴度，但操作不当可能损失病毒颗粒。