 
		1. 载体质粒(Transfer Plasmid)
作用:载体质粒包含目的基因和转录调控元件。目的基因由启动子驱动,在感染细胞中表达。
关键组成:
启动子(如 CMV、EF1α等)
目的基因
报告基因(如 GFP、RFP 等,视实验需求而定)
包装信号(Ψ序列,用于将 RNA 包装成病毒颗粒)
LTR(长末端重复序列)
2. 包装质粒(Packaging Plasmid)
作用:提供慢病毒颗粒组装所需的核心蛋白,但这些蛋白不会整合到病毒基因组中。
关键组成:
Gag(基因组装蛋白):负责病毒核心的形成。
Pol(逆转录酶和整合酶):负责逆转录和基因组整合。
Rev:增强病毒 RNA 的输出和组装效率。
3. 包膜质粒(Envelope Plasmid)
作用:编码病毒的包膜蛋白,决定病毒的感染宿主范围。
常用包膜蛋白:
VSV-G(囊泡性口炎病毒包膜蛋白):通用性强,可感染多种细胞类型。
其他特异性包膜蛋白(如 Rabies G,用于神经系统研究)。
4. 辅助质粒(Optional Helper Plasmid)
作用:在某些系统中提供额外辅助因子以提高包装效率。
应用场景:不常见,但在特殊需求的实验中可能会用到。
常用慢病毒包装系统
二质粒系统
包括载体质粒和含有 Gag-Pol 和包膜基因的单一包装质粒。
简单高效,但表达调控较为固定。
三质粒系统
包括载体质粒、包装质粒和包膜质粒。
优势:表达调控灵活,安全性高。
四质粒系统
包括载体质粒、Gag-Pol 质粒、Rev 质粒和包膜质粒。
优势:进一步减少病毒的自我复制能力,实验安全性更高。
关于派真
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