慢病毒载体在反复冻融时会导致病毒滴度下降，具体的下降幅度取决于以下因素：
1.冻融次数：通常一次冻融可能导致滴度下降约10%-20%，而多次冻融后，病毒的活性可能大幅下降。
2.病毒类型和稳定性：不同慢病毒载体的稳定性差异较大，有些更容易在冻融过程中失活。
3.冷冻和解冻条件：如果冻融过程过于剧烈，例如快速升温或反复震荡，病毒的损伤会更大。
4.保存液成分：使用含有保护剂（如甘油或牛血清白蛋白）可以显著减缓滴度下降。
一般建议
避免多次冻融：将病毒液分装成小体积后再冷冻，避免反复冻融。
解冻时操作温和：在37℃水浴中快速解冻，但避免时间过长，并轻轻混匀，减少机械损伤。
加入保护剂：在制备病毒液时加入适量的稳定剂，有助于维持活性。
如果已经多次冻融，建议重新测定病毒滴度，以确定实际的滴度下降幅度。如果需要高滴度的病毒，最好重新制备。