AAV包装病毒多长时间可以收集病毒

2025年2月5日
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AAV(腺相关病毒)包装后,病毒的收集时间一般取决于细胞系、转染方法和培养条件。常见的AAV生产体系是293T或HEK293细胞,以下是常规的病毒收集时间参考:

1.最佳收集时间

在常见的HEK293细胞系统中,AAV病毒通常在转染后 48-72小时 达到较高的滴度。这是病毒产量最高的时间段。

2.过早或过晚收集的影响

过早收集(如24小时):可能导致病毒滴度较低,因为病毒尚未充分复制和包装。

过晚收集(超过72小时):细胞可能开始死亡,释放大量细胞碎片,增加下游纯化的难度,并可能降低病毒质量。

3.病毒存在的位置

细胞内病毒:如果目标是收集细胞内的AAV病毒颗粒,建议在转染后48-72小时裂解细胞。

细胞外病毒:部分AAV病毒会分泌到培养基中,因此也可以在48-72小时内收集培养上清。

4.优化收集时间

可以通过qPCR或ELISA检测病毒基因组拷贝数或衣壳蛋白数量,进一步优化收集时间。

显微镜观察细胞状态,确保在细胞大规模凋亡前收集样品,以减少杂质。

5.实验调整

根据实验需求,可以在不同时间点(如24小时、48小时、72小时)收集样品,分析病毒滴度以确定最佳收集时间。

关于派真

作为一家专注于AAV 技术十余年,深耕基因治疗领域的CRO&CDMO,派真生物可提供从载体设计、构建到 AAV、慢病毒和 mRNA 服务的一站式解决方案。凭借深厚的技术实力、卓越的运营管理和高标准的服务交付,我们为全球客户提供一站式CMC解决方案,包括从早期概念验证、成药性评估到IITINDBLA的各个阶段。

 

凭借我们独立知识产权的π-alphaTM 293 细胞AAV高产技术平台,我们能将AAV产量提高多至10倍,每批次产量可达1×10¹⁷vg,以满足多样化的商业化和临床项目需求。此外,我们定制化的mRNA和脂质纳米颗粒(LNP)产品及服务覆盖药物和疫苗开发的各个阶段,从研发到符合GMP的生产,提供端到端的一站式解决方案。

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