慢病毒感染效率不高可能由多种因素导致，以下是主要原因及分析：
1.病毒自身因素
病毒滴度低：如果慢病毒的滴度过低，意味着单位体积中病毒颗粒数量少，细胞接触到病毒颗粒的概率降低，从而导致感染效率不高。
病毒活性不足：病毒在制备、运输或保存过程中，若操作不当，如反复冻融、长期暴露在室温等，会导致病毒活性下降。例如，每次冻融会使病毒滴度降低约10%，-80℃保存半年以上需重新测定滴度。
病毒包装制备问题：在慢病毒的包装过程中，若质粒质量差（如污染、降解）、包装质粒和载体质粒比例不合适，或转染效率低，都会影响病毒颗粒的质量和数量。
2.细胞相关因素
细胞类型：不同细胞对慢病毒的感染敏感性不同。一些细胞（如某些原代细胞、干细胞、不分化的细胞等）较难被感染，可能需要更高的病毒量或采用特殊方法（如离心感染）来提高感染效率。
细胞生长状态：细胞处于对数生长期且形态良好、轮廓清晰时，感染效率较高。若细胞处于老化、损伤或生长停滞状态，细胞膜的流动性和表面受体的表达可能受到影响，从而降低感染效率。
3.感染操作因素
感染复数（MOI）不合适：MOI值过大或过小都会影响感染效率。MOI值过大可能导致细胞毒性增加，而MOI值过小则病毒颗粒不足以有效感染细胞。
感染时间和换液时间不当：慢病毒一般在感染后24小时换液，换液过早或过晚都会影响感染效率。此外，观察荧光等指标的时间也需根据细胞类型和病毒特性进行调整。
未添加助转染试剂：助转染试剂如polybrene可中和细胞表面的负电荷，促进病毒与细胞膜结合，从而提高感染效率。
4.其他因素
病毒纯度不够：如果慢病毒产品未经过超速离心纯化，杂质较多，可能会影响感染效率。
实验环境和操作规范：实验操作需在生物安全柜内进行，避免病毒污染和交叉感染。若操作不规范，可能导致细胞状态变差或感染效率降低。
关于派真
作为一家专注于AAV 技术十余年，深耕基因治疗领域的CRO&CDMO，派真生物可提供从载体设计、构建到 AAV、慢病毒和 mRNA 服务的一站式解决方案。凭借深厚的技术实力、卓越的运营管理和高标准的服务交付，我们为全球客户提供一站式CMC解决方案，包括从早期概念验证、成药性评估到IIT、IND及BLA的各个阶段。
凭借我们独立知识产权的π-alphaTM 293 细胞AAV高产技术平台，我们能将AAV产量提高多至10倍，每批次产量可达1×10¹⁷vg，以满足多样化的商业化和临床项目需求。此外，我们定制化的mRNA和脂质纳米颗粒（LNP）产品及服务覆盖药物和疫苗开发的各个阶段，从研发到符合GMP的生产，提供端到端的一站式解决方案。
