
腺相关病毒(AAV)是一种常用于基因治疗和基因编辑的病毒载体,根据其改造程度和实验操作的不同,所需的实验室生物安全等级(BSL,Biosafety Level)也有所不同:
BSL-1 实验室
适用于重组 AAV(rAAV),且该 AAV 不能复制、无致病性,并且不携带任何有害基因(如致癌基因、毒性基因等)。
rAAV 本身被认为是低风险的,因为它通常不引起人类疾病,且不具备自我复制能力。
适用于大多数基础研究和一般细胞培养实验。
BSL-2 实验室
必须在 BSL-2 级别进行的情况包括:
处理含有 致病基因 或 增强复制能力 的 rAAV。
生产高滴度的 AAV 病毒颗粒(特别是在使用哺乳动物细胞系 HEK293 进行病毒包装时)。
研究涉及 体内实验(动物实验),特别是 AAV 载体被用于动物体内传播基因时。
任何涉及人体细胞或血液制品的实验(因为潜在的生物危害)。
BSL-3 或更高级实验室
AAV 本身一般不需要 BSL-3,但如果 AAV 被改造为表达高危病毒基因(如 HIV、SARS-CoV-2 的关键蛋白等),或者与其他危险病毒结合使用时,则需要更高级别的生物安全防护。
BSL-3 也可能适用于涉及基因治疗的特定临床前研究,尤其是高剂量病毒递送到活体动物或人类样本的情况。
大多数 AAV 实验可以在 BSL-1 或 BSL-2 实验室 进行,具体取决于病毒的改造情况和实验风险。如果 AAV载体仅用于无害基因的表达,BSL-1 就足够;但如果涉及高滴度病毒生产、致病基因表达或体内实验,则需要 BSL-2。
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