AAV(腺相关病毒)浓缩液在摇动一夜后是否仍可使用,需考虑以下因素:
1.摇动条件:
温度:若在室温下摇动,可能加速病毒降解,建议长期储存于4℃或-80℃。低温摇床(如4℃)影响较小。
机械应力:高速摇动或产生气泡可能破坏病毒衣壳,降低感染效率。
2.稳定性检测:
滴度测定:使用qPCR检测基因组滴度,或通过细胞感染实验测定功能滴度,确认病毒活性是否达标。
完整性检查:SDS-PAGE或电子显微镜观察衣壳完整性。
3.后续建议:
避免长时间扰动:浓缩后尽快分装保存,减少物理扰动。
优化储存条件:使用含稳定剂(如甘油、血清)的缓冲液,并严格控温。
分装使用:避免反复冻融,每次使用前短暂离心去除聚集。
用途要求:如果 AAV 是用于体外实验(如细胞感染),可以先检测滴度再决定是否继续使用;如果是用于动物实验或临床相关应用,建议重新制备或检测活性后再使用。
若检测显示滴度符合实验要求且结构完整,摇动后的AAV仍可使用;若滴度显著下降,建议重新制备或浓缩。日常操作中应严格控制储存与处理条件,以维持病毒稳定性。