AAV(腺相关病毒)病毒滴度单位vg/mL(Vector Genomes per milliliter)代表每毫升病毒液中含有的病毒基因组拷贝数。以下是具体说明:

1、定义

vg/mL:即病毒基因组数每毫升,表示单位体积病毒液中病毒基因组的数量。

GC/mL:基因组拷贝数每毫升,与vg/mL在数值上等同,均用于描述单位体积内病毒基因组的数量。

2、检测方法

qPCR(实时荧光定量PCR):通过检测病毒基因组的特定序列,计算出病毒基因组拷贝数。

ddPCR(数字PCR):将反应体系分割成大量微小的反应单元,对每个单元进行PCR扩增和检测,从而实现对病毒基因组拷贝数的精确测定。

3、应用场景

基因治疗:在基因治疗中,准确的病毒滴度对于确保治疗效果和安全性至关重要。高滴度的病毒液可以提高基因传递的效率。

实验研究:在实验室中,AAV病毒常用于基因功能研究、疾病模型构建等。准确的滴度有助于优化实验条件,确保实验结果的可靠性和可重复性。

4、注意事项

区分物理滴度和感染滴度:物理滴度(如vg/mL)反映的是病毒颗粒的数量,包括有活性和无活性的病毒颗粒;而感染滴度(如TU/mL)则表示能够成功转导细胞的病毒颗粒数量。

不同检测方法的差异:qPCR和ddPCR虽然都能检测病毒基因组拷贝数,但ddPCR的灵敏度和准确性通常更高。