AAV（腺相关病毒）在应用中可能出现病毒颗粒聚集（aggregation）现象，这种聚集对实验和临床应用都会产生一定的负面影响。
一、AAV聚集的影响
1. 滴度测定不准确
聚集体中多个AAV粒子被统计为一个单位，导致通过qPCR、ELISA等方法测得的滴度偏低或不稳定。
2. 感染效率降低
聚集的AAV不易被细胞摄取，尤其是在低MOI（Multiplicity of Infection）条件下；
聚集可能阻碍病毒颗粒与细胞膜受体的结合；
聚集还可能引发非特异性吸附或沉降，导致分布不均。
3. 免疫原性增强
多个病毒颗粒聚集后，可能更容易被宿主免疫系统识别，引发中和抗体产生或炎症反应。
4. 纯化和储存过程问题
聚集的病毒难以在纯化过程中分离；
容易堵塞过滤膜；
储存过程中聚集会加剧病毒活性下降。
5. 跨批次一致性差
聚集程度变化会导致实验结果波动，影响可重复性和产品质量控制。
二、AAV聚集的原因
缓冲体系不合理（如pH或盐浓度不合适）；
病毒浓度过高；
冻融循环次数过多；
储存温度不当（如反复暴露于高温或冰点附近）；
物理剪切力（如剧烈震荡或超声）破坏病毒衣壳，引起聚集。
三、常见的应对方法
| 使用适当缓冲体系（如PBS + 0.001% Pluronic） | 提供合适环境，减少颗粒间作用 |
| 控制病毒浓度 | 过高浓度易聚集，稀释后稳定性更好 |
| 减少冻融次数 | 建议小分包装，一次性使用 |
| 低温保存（-80℃） | 减缓聚集和降解过程 |