AAV病毒(腺相关病毒,Adeno-Associated Virus)在体外的存活时间受到多个因素的影响,比如温度、pH值、保存介质和表面材料等。以下是一些常见条件下的参考信息:
1. 在常温(室温,20–25°C)下
溶液中(如PBS或培养基):通常能稳定存活数小时到几天,但病毒活性会逐渐下降。
干燥状态(如吸附在塑料、玻璃表面):病毒颗粒可能仍可检测,但活性通常会在数小时内迅速降低。
2. 在4°C冷藏条件下
在缓冲液(如PBS、Tris缓冲液等)中保存,AAV的结构相对稳定,感染活性可维持数周。
但如果含有细胞裂解物或蛋白酶等杂质,可能影响稳定性。
3. 在-20°C或-80°C冷冻条件下
AAV病毒在甘油或甘油/Tris缓冲液中冷冻可长期保存,-80°C可保持活性达数年,是实验室常用的储存方式。
注意反复冻融会破坏病毒颗粒,降低滴度,建议分装保存。
4. 在细胞培养环境(体外感染实验)中
一旦加入细胞培养液中,如果未立即与细胞结合,AAV可在培养基中稳定存在数小时。
通常建议在感染后4–6小时内更换培养基,可减少非特异吸附和降低细胞毒性风险,尤其是在高剂量感染(高MOI)时。