aav包装的质粒包括哪些

AAV包装一般使用 三质粒系统（Three-plasmid system），也有二质粒与四质粒系统，但核心原理相同。

一、三质粒体系（最常用）

1. 载体质粒（Transfer Plasmid）

包含：

• ITR（Inverted Terminal Repeat） × 2

• 目的基因表达盒：启动子 → cDNA → PolyA

• 可含增强子、WPRE、诱导元件等

作用：提供 AAV基因组，决定最终病毒内所携带的遗传信息。

常见名称：pAAV-MCS、pAAV-CAG-GFP 等。

2. 衣壳质粒（Capsid Plasmid / Rep-Cap Plasmid）

包含：

• Rep 基因：AAV复制所需

• Cap 基因：编码衣壳蛋白 VP1/2/3

• 决定 血清型（Serotype）：如 AAV2、AAV8、AAV9、PHP.eB、DJ、Anc80 等

作用：提供 包装外壳和血清型特性。

3. 辅助质粒（Helper Plasmid）

提供腺病毒所需的辅助功能基因，例如：

• E2A

• E4

• VA RNA

作用：提供 AAV包装所需的 辅助因子（不含病毒基因组，因此不会产生腺病毒）。

常见：pHelper（来自Agilent等）。

二、二质粒系统（简化版）

某些商业公司使用 2-plasmid 系统：

• 载体质粒（含 ITR + 基因）

• 超大 Rep-Cap + Helper 合并质粒

特点：转染更简单、滴度较高，但质粒通常较大。

三、四质粒系统（增强安全性）

更常见于慢病毒，但部分AAV工程用四质粒：

• Transfer

• Rep

• Cap

• Helper

主要用于灵活更换 Rep / Cap 组合或工程化筛选。

最经典的 AAV 包装需要 3 个质粒：Transfer（ITR+目的基因）+ Rep/Cap（衣壳） + Helper（腺病毒辅助基因）。