慢病毒（Lentivirus）感染细胞后出现荧光（或目标基因表达）的时间，通常取决于以下因素：病毒滴度、细胞类型、启动子强度以及表达蛋白的稳定性。一般规律如下：
常规慢病毒感染后荧光出现时间
1. 早期表达：24–48 小时
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慢病毒在进入细胞后，会在 24–48 h 开始出现初步的荧光信号。
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这一阶段属于 未整合表达（episomal expression），信号较弱、不稳定。
2. 稳定强荧光表达：72–96 小时
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随着病毒基因组整合到宿主细胞基因组中，表达会逐渐稳定。
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通常在 感染后 3–4 天（72–96 h），可以看到 稳定且强烈的荧光。
3. 完全稳定：5–7 天
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当细胞完成几轮分裂并建立稳定细胞系后，荧光信号趋于稳定。
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若进行 抗性筛选（如 puromycin），一般在 5–7 天后效果最好。
影响荧光出现时间的因素
| 因素 | 影响 |
| 病毒 MOI | MOI 越高，越早看到荧光 |
| 细胞类型 | 分裂快的细胞更快看到整合表达 |
| 启动子强度 | EF1α、CMV、SFFV > PGK、UbC |
| 荧光蛋白类型 | GFP 通常比 mCherry/mKate 更容易被检测到 |
| 病毒感染效率 | 若添加 Polybrene，可加快荧光出现 |
实验建议
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若你在 48 小时 看不到明显荧光，不要惊讶，继续等到 72–96 小时再判断。
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想建立稳定株，建议 72 小时后开始抗性筛选。
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