AAV转染多久可以看到荧光

2025年11月25日

AAV（腺相关病毒）转染后观察荧光的时间取决于几个因素：病毒血清型、载体启动子强弱、靶细胞类型和感染效率。一般规律如下：

起始表达时间：
- 大部分情况下，AAV感染后24–48小时开始出现微弱的荧光信号，但通常不易肉眼观察。

明显可见荧光：
- 一般需要3–7天，荧光信号才比较明显，可以通过荧光显微镜清楚看到。

峰值表达时间：
- 对多数AAV载体，尤其是在哺乳动物细胞中，荧光蛋白表达通常在2–3周达到峰值，尤其是慢慢增强的启动子（如CAG、EF1α）。

影响因素：
- AAV血清型：不同血清型感染效率不同，速度也不同（如AAV2在多数贴壁细胞较慢，AAV-PHP.eB在神经元中效率高）。
- MOI（感染复数）：MOI越高，早期荧光越明显。
- 细胞类型：分裂细胞和非分裂细胞的表达速度不同，神经元等非分裂细胞可能需要更长时间。

如果你使用常规AAV载体在常规哺乳动物细胞中转染，通常3–7天可以看到明显荧光，完全稳定表达可能需要2周以上。

常见AAV血清型 + 启动子组合下的荧光出现时间表，基于体外哺乳动物细胞感染的经验数据（仅供参考，实际时间会受MOI和细胞类型影响）：

AAV血清型	常用启动子	荧光初现	明显可见	峰值表达
AAV2	CMV	24–48h	4–7天	14–21天
AAV2	CAG	24–48h	3–6天	14–21天
AAV2	EF1α	24–48h	4–7天	14–21天
AAV5	CMV	24–48h	4–7天	14–21天
AAV5	CAG	24–48h	3–6天	14–21天
AAV9	CMV	24h	3–5天	10–14天
AAV9	CAG	24h	2–4天	10–14天
AAV-PHP.eB	CAG/EF1α	24h	2–4天	7–14天
AAVDJ	CAG	24h	2–3天	7–14天

说明：

初现：荧光刚刚可检测到，信号弱。

明显可见：用荧光显微镜可以清楚观察到大部分感染细胞有信号。

峰值表达：荧光达到最高水平并相对稳定。

影响因素：MOI高低、细胞类型、培养状态、温度等都会影响荧光出现时间。

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