aav的感染滴度单位是什么,一般如何测定

2025年11月28日
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AAV(腺相关病毒)的感染滴度通常用以下单位表示,并可通过多种实验方法测定:

① 感染滴度的常用单位

类型 含义 常用单位 说明
基因组滴度(Physical Titer) 实际病毒颗粒中基因组拷贝数 vg/mL(vector genome/mL) 或 GC/mL 最常用的滴度单位,用于判断病毒总量
感染滴度(Functional/Transducing Titer) 能进入细胞并产生表达的病毒数 IFU/mL(Infectious Unit/mL) 或 TU/mL(Transducing Units/mL) 反映功能性病毒颗粒比例
生物活性滴度(Biological Titer) 指示病毒真正发挥表达能力的比例 FFU/mL、ID50 等 多用于功能比较或动物实验

AAV最常见的滴度表示为 vg/mL(基因组滴度),功能活性则常用 TU/mL 或 IFU/mL

② AAV滴度的常见测定方法

⭐ 基因组滴度(vg/mL)测定

适用于确定病毒总颗粒数:

方法 原理 优点 缺点
qPCR/ ddPCR 扩增病毒基因序列(如ITR、WPRE、CMV等)定量 快速准确、常规最常用 测总量,不区分活病毒与空壳
荧光定量 PCR(qPCR) 根据Ct值计算基因组数 设备普及、数据标准化 精准度略低于ddPCR
数字PCR(ddPCR) 单分子水平定量 绝对定量、误差低 仪器成本高

⭐ 感染滴度/功能滴度(TU/mL、IFU/mL)

用于评估病毒对细胞的真实感染效率:

方法 原理 适用场景
GFP/RFP 等报告基因流式检测 感染细胞后测阳性比例计算TU/mL 表达型载体最常用
免疫荧光(IF)计数 对特定蛋白表达染色计数感染阳性细胞 非报告基因也适用
qPCR/RT-qPCR检测转录本拷贝数 测量感染后转录水平 精确评估功能表达
ELISA/Western blot 测蛋白表达强度间接推算滴度 更适合比较,而非绝对定量

总结

滴度类型 单位 测定方式
基因组滴度 vg/mL、GC/mL qPCR / ddPCR(最常用)
感染滴度 TU/mL、IFU/mL 流式细胞术、免疫荧光、RT-qPCR
生物活性滴度 FFU/mL 等 表达功能实验

关于派真

作为一家专注于AAV 技术十余年,深耕基因治疗领域的CRO&CDMO,派真生物可提供从载体设计、构建到 AAV、慢病毒和 mRNA 服务的一站式解决方案。凭借深厚的技术实力、卓越的运营管理和高标准的服务交付,我们为全球客户提供一站式CMC解决方案,包括从早期概念验证、成药性评估到IITINDBLA的各个阶段。

 

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