aav空载体和aav空壳病毒区别

空载体 = 有骨架但无基因，可包装成完整颗粒，用于对照和载体优化。

空壳病毒 = 仅衣壳，无基因组，用于研究衣壳功能、免疫耐受或改造为非基因型递送载体。

一、核心定义与结构差异

1. AAV 空载体（Empty Vector）

本质：包含完整的AAV基因组骨架（ITR + 载体骨架），但缺失目的基因（治疗基因或报告基因）的重组AAV载体。

结构组成：

• 外壳：AAV衣壳蛋白（Cap蛋白，如AAV2、AAV9等血清型）
• 内部基因组：仅保留复制必需的反向末端重复序列（ITR）及载体骨架序列（如启动子、终止子骨架），无功能基因

关键特征：保持完整载体结构，可被衣壳包裹形成颗粒，但因无目的基因无法表达目标蛋白。

2. AAV 空壳病毒（Empty Capsid）

本质：仅由AAV衣壳蛋白组装而成的“空心颗粒”，完全不含任何DNA（包括ITR）。

结构组成：衣壳蛋白VP1、VP2、VP3按比例组装，内部无基因组。

关键特征：只保留外壳结构，无法复制或表达，属于纯衣壳蛋白复合物。

二、制备原理差异

1. AAV 空载体

基于常规重组AAV载体包装流程，但去除质粒中的目的基因，仅保留ITR和载体骨架。

通常共转染3种质粒：

1. 1. 空载体骨架质粒：含ITR + 无目的基因

   2. Rep/Cap包装质粒：提供复制酶和衣壳蛋白

   3. 辅助质粒：提供腺病毒辅助因子（如E1A、E1B）

包装后，衣壳蛋白包裹空载体基因组（ITR + 骨架），形成完整空载体颗粒。

2. AAV 空壳病毒

核心原则是 只表达衣壳蛋白，不提供可包装的基因组：

• 方法1：转染Cap表达质粒（或Rep/Cap质粒）+ 辅助质粒，但不提供含ITR的载体骨架，衣壳蛋白自发组装为空心颗粒。
• 方法2：从常规AAV包装产物中分离空壳颗粒，通过密度梯度离心（如CsCl梯度）或离子交换层析纯化得到纯空壳。

三、核心功能与应用场景

1. AAV 空载体

• 阴性对照（载体骨架对照）：
  排除载体骨架（如ITR、启动子）而非目的基因对细胞或动物的影响。

• 载体优化工具：
  测试不同血清型衣壳或启动子骨架的安全性和转染效率，无需关注基因表达。

2. AAV 空壳病毒

• 阴性对照（衣壳对照）：
  排除衣壳蛋白本身的影响（如免疫原性、细胞毒性）。

• 免疫耐受诱导（实验研究）：
  预先注射空壳可在实验中诱导机体对AAV衣壳产生一定免疫耐受，降低后续治疗用AAV的清除。

• 衣壳功能研究：
  分析衣壳的细胞结合、内化效率及组织靶向性，无需考虑基因组影响。

• 药物递送载体（需改造）：
  化学或生物修饰后，可将小分子、蛋白质或siRNA负载到空壳中，实现靶向递送，同时避免基因组相关风险。