aav9 rep/cap质粒

AAV9 rep/cap 质粒，简单说就是提供 AAV9 血清型外壳和复制功能的包装辅助质粒，在 AAV 病毒制备中是必不可少的三大件之一。

一、AAV9 rep/cap 质粒是什么？

AAV9 rep/cap 质粒同时携带：

1.rep 基因

• rep78 / rep68 / rep52 / rep40
• 负责 AAV 基因组复制、包装调控

2.cap 基因（AAV9 血清型）

• VP1 / VP2 / VP3
• 决定病毒的血清型、生物分布和组织嗜性

⚠️ 该质粒不含 ITR，本身不会被包装进病毒。

二、在 AAV 包装中的位置

典型的 三质粒系统：

1.转移质粒（ITR-GOI）

• 含 ITR + 目的基因

2.AAV9 rep/cap 质粒 ✅

• 提供复制与衣壳

3.辅助质粒（Helper plasmid）

• 提供 adenovirus 辅助基因（E2A / E4 / VA RNA）

三者共转染（常用 HEK293 / 293T）即可产生 AAV9 病毒。

三、AAV9 血清型特点（为什么选 AAV9）

AAV9 非常“卷”，科研和转化都常用：

🧠 可跨血脑屏障（BBB）（尤其新生鼠、静脉注射）

❤️ 心脏、🫁 肺、🧠 中枢神经系统转导效率高

🧬 广泛用于

• 神经系统
• 心血管
• 肌肉疾病
• 基因治疗研究

四、质粒基本参数（常见）

不同公司略有差异，以下为常见区间

质粒大小：约 7.5–8.5 kb

启动子：

• rep / cap 通常由 AAV 自身调控元件控制

抗性：Ampicillin（最常见）

用途等级：

• 科研级（Research Grade）
• GMP 级需特殊构建与溯源

五、使用时的关键注意点 ⚠️

1.rep/cap 与血清型一一对应

• AAV9 病毒 ≠ AAV2 / AAV8 rep/cap

2.质粒质量直接影响滴度

• 内毒素高 → 细胞状态差 → 滴度低

3.cap 表达比例影响空壳率

• cap 过量 → 空壳病毒比例升高

4.科研级 ≠ 临床可用

• 若考虑 IND / 临床，rep/cap 来源、序列、检测都要升级

六、常见问题（你可能也会遇到）

Q：AAV9 rep/cap 能不能和其他 ITR 搭？

👉 可以，rep 主要识别 ITR2，是行业通用做法

Q：AAV9 滴度低和 rep/cap 有关系吗？

👉 很多时候有：

• 质粒质量
• rep/cap 比例
• cap 表达平衡