病毒包装常见问题（FAQ）

病毒包装是基因功能研究和基因治疗研究中的关键环节，而顺利推进项目往往取决于前期信息是否完整、载体设计是否合理。在实际咨询过程中，客户常常对“是否已有目的基因”“启动子如何选择”“是否需要加标签”“基因是否存在毒性”等问题存在疑惑。为帮助您更高效地完成病毒构建与包装，我们整理了病毒包装过程中最常见的问题与要点说明，涵盖从基因准备到载体设计及质量控制的核心环节，供您在项目规划与下单前参考。

Q1：做病毒包装前，我需要准备哪些信息？

通常需要以下核心信息：

• 基因名称及物种来源（Human / Mouse / Rat 等）

• 是否已有目的基因序列或质粒

• 实验用途（体外细胞 / 动物体内）

• 病毒类型（慢病毒或 AAV）

• 是否需要加标签（Flag、HA、GFP 等）

Q2：我只有基因名，没有序列或质粒，可以做病毒吗？

可以。这种情况下将进行基因设计与人工合成，并构建至相应的质粒载体后再进行包装。该方案周期相对较长、成本较高。

Q3：我已经有 CDS 序列或质粒，还需要做什么？

• 若已有病毒过表达质粒，可直接用于病毒包装；

• 若只有 CDS 序列但无载体，需要进行载体克隆后再包装。

Q4：启动子怎么选？有什么区别？

启动子决定表达强度和稳定性，常见选择包括：

• CMV：强表达，适合体外细胞

• EF1α：稳定表达，适合长期或 in vivo

• PGK：表达温和，适合潜在毒性基因

• CAG：强且稳定，常用于动物实验

• 组织特异性启动子：用于特定细胞或组织

Q5：是否一定要加标签？

不一定。标签用于表达检测、定位或筛选，常见有 Flag、HA、GFP、mCherry 等。需提前确认标签类型及 N 端 / C 端位置，避免影响蛋白功能。

Q6：为什么一定要确认基因物种？

病毒载体中的基因序列必须与目标物种一致。
例如人源基因用于小鼠实验，通常需要使用小鼠同源基因序列。

Q7：什么是“有毒性基因”？会有什么影响？

部分基因在过表达时可能对细胞产生毒性，如：

• 转录因子

• 凋亡相关蛋白

• 激酶、离子通道蛋白

可能导致病毒滴度降低或细胞死亡。
通常可通过更换启动子、降低表达强度或使用诱导系统进行优化。

Q8：慢病毒和 AAV 怎么选？

• 慢病毒（LV）：可整合，适合体外实验及分裂细胞

• AAV：非整合，更适合动物体内实验

Q9：病毒包装完成后会做哪些质量检测？

常规检测包括：

• 病毒滴度

• 支原体

• 内毒素

AAV 还可检测空壳率，部分项目可提供表达验证。

Q10：我怎么最快下单、不反复沟通？

建议一次性提供：

• 基因名 + 物种

• 是否已有序列或质粒

• 实验用途

• 启动子与标签需求

• 是否可能存在毒性

• 病毒类型