慢病毒(Lentivirus)在解冻后不建议长时间放在 4 °C 保存,具体可参考以下经验和建议:
一、慢病毒化冻后在 4 °C 的保存时间
推荐时间
-
最好在 24 小时内使用
-
最长不超过 48 小时
超过 24 小时后,病毒滴度通常会开始明显下降,尤其是高滴度慢病毒。
二、影响 4 °C 保存稳定性的主要因素
1.病毒滴度
- 初始滴度越高,短期内感染能力保留相对更好
2.保存缓冲液
- 含 10–20% 甘油、BSA 的体系稳定性更好
3.是否反复冻融
- 每一次冻融都会明显降低感染效率
4.病毒类型
- VSV-G 包膜的慢病毒在 4 °C 下相对更稳定,但仍不适合久放
三、实际操作建议(强烈推荐)
- 化冻后立即分装(小体积,如 20–50 µL)
- 短期(当天或次日)实验:4 °C 暂存
- 超过 48 小时未使用:不建议再用于关键实验
- 不建议在 4 °C 连续存放数天
- 不建议反复冻融同一管病毒
四、最佳保存方式总结
| 保存条件 | 建议用途 |
| −80 °C | 长期保存(数月–1 年) |
| −20 °C | ❌ 不推荐 |
| 4 °C | ≤24 h(最多 48 h) |
| 室温 | ❌ 几小时内即明显失活 |
慢病毒解冻后在 4 °C 条件下,最好 24 小时内用完,最迟不超过 48 小时,否则感染效率会明显下降。
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