小鼠腹腔注射 AAV 载体的实验准备、剂量配制与操作流程

2026年6月8日

适用范围：腹腔注射适用于 AAV 等病毒载体的全身或腹腔内给药，可用于肝脏、脾脏、胰腺、肠道/结肠等组织相关研究；具体转导效率取决于 AAV 血清型、启动子、剂量、动物年龄和实验模型。

1.实验前准备：

必须物品：病毒原液(储存在-80°C冰箱中，冰上解冻)、无菌注射用生理盐水或PBS(用于稀释病毒)、无菌1mL注射器、无菌注射针头(对于成年小鼠，推荐27-30G；对于新生小鼠30-31G)、70%乙醇、实验手套(无粉末)、实验服、口罩和护目镜(生物安全防护)、小鼠固定器或助手协助固定、废弃物容器(锐器盒和生物废弃物袋)、实验记录本、标记笔(用于标记小鼠)、清洁工作台或生物安全柜(取决于实验室安全级别要求)

可选物品：小鼠电子体重计、加热垫(用于术后保温，特别是对于新生小鼠)、计时器

2.病毒液的准备

使用无菌PBS或生理盐水稀释病毒至所需浓度。用注射器吸取适量的病毒液，确保无气泡，置于冰上备用。成年小鼠 AAV 腹腔注射常用体积为 50–200 µL，具体体积应根据剂量、病毒滴度、动物体重和本机构动物伦理要求确定。新生小鼠腹腔注射体积应根据日龄和体重严格控制，常见范围约 5–30 µL；较大体积如 50 µL 需确认符合机构 SOP 和动物伦理审批。

3.动物固定

成年小鼠：使用标准小鼠固定方法，头部偏低以使腹部器官向头侧移动。

新生小鼠：用拇指和食指轻轻握住小鼠，使其保持俯卧位。

腹腔注射

图片来源：https://animalcare.ubc.ca/sites/default/files/documents/TECH%2010%20IP%20Injections%20in%20the%20Mouse%20and%20Rat.pdf

腹腔注射2

图片来源：https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC10518777/

4.病毒注射

a.使用70%乙醇棉球擦拭腹部注射部位，消毒皮肤。

b.将小鼠腹部朝上。注射位置应在腹部下方四分之一区域，偏右或偏左侧(避开中线)，避开膀胱、肝脏和其他可见器官。以30-45°角将针头插入腹壁，插入深度约5-8mm。轻轻回抽注射器活塞，确认针头未进入血管或穿刺内脏(无血液或其他液体回流)。缓慢注入AAV溶液(约0.5-1mL/分钟)，避免快速注射。

腹腔注射3

图片来源：https://animalcare.ubc.ca/sites/default/files/documents/TECH%2010%20IP%20Injections%20in%20the%20Mouse%20and%20Rat.pdf

腹腔注射4

图片来源：https://pmc.ncbi.nlm.nih.gov/articles/PMC10518777/

c.完成注射后，轻轻拔出针头，并轻压注射部位几秒防止溶液渗出。

d.将小鼠放回笼中，确保有清洁的垫料。新生小鼠需放置在加热垫上维持体温，避免低温。

注射后至少观察30分钟，确认无不良反应。

5.常见问题与解决方案

问题	解决方案
液体回流，可能是注射速度过快或针头未正确插入腹腔	减慢注射速度，确保针头位置正确
注射困难，可能是针头堵塞或注射角度不当	更换针头，调整注射角度
动物应激反应	确保动物适当固定，操作迅速而温和
感染效率低	考虑增加病毒剂量，或检查病毒质量和储存条件

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