aav病毒冻融会导致空壳增加吗

2025年2月25日
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是的,AAV(腺相关病毒)在冻融过程中可能会导致空壳(empty capsids)比例增加。主要原因包括:

1.结构不稳定性:AAV的衣壳在冻融过程中可能受到物理应力的影响,导致部分基因组脱落,形成空壳。

2.冰晶损伤:冷冻和解冻过程中,冰晶的形成可能损伤病毒颗粒,使其基因组泄露。

3.pH和离子浓度变化:冻融可能引起缓冲液的pH值和离子浓度波动,从而影响AAV的稳定性。

4.蛋白聚集:冻融可能导致AAV的衣壳蛋白发生聚集或构象变化,影响基因组的保持。

如何减少空壳增加?

1.添加保护剂

2.快速冷冻:使用液氮或-80°C速冻,减少冰晶生长时间。

3.避免多次冻融:尽量分装储存,减少冻融循环的次数。

4.使用合适的存储温度:AAV通常建议在-80℃长期储存,短期可在4℃保存,但避免在-20℃存储,以减少反复冻融的影响。

如果你的实验对完整病毒比例要求较高,建议在使用前检测AAV的完整性(如通过qPCR和ELISA测定基因组和衣壳的比例)。

关于派真

作为一家专注于AAV 技术十余年,深耕基因治疗领域的CRO&CDMO,派真生物可提供从载体设计、构建到 AAV、慢病毒和 mRNA 服务的一站式解决方案。凭借深厚的技术实力、卓越的运营管理和高标准的服务交付,我们为全球客户提供一站式CMC解决方案,包括从早期概念验证、成药性评估到IITINDBLA的各个阶段。

 

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