慢病毒（Lentivirus）包装的四质粒系统（4-plasmid system）是目前常用的一种高安全性、高效率的包装方式，用于生产第三代慢病毒载体。相比早期的三质粒系统，它通过进一步分离病毒的功能基因，显著降低了重组产生复制型病毒（RCL，Replication-Competent Lentivirus）的风险。
一、四质粒系统的组成
四质粒系统通常包括以下四个质粒：
二、包装原理
在 HEK293T 等高转染效率细胞中共同转染以上四个质粒后：
1.Gag/Pol、Rev、VSV-G 等辅助蛋白由包装质粒表达；
2.转移载体上的目的基因 RNA 被这些蛋白包装进病毒颗粒；
3.形成的慢病毒颗粒被分泌到培养上清中；
4.收集上清，即可用于感染靶细胞。
三、三质粒系统与四质粒系统的区别
四、应用与优势
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适合科研用基因过表达、敲降（shRNA/siRNA）、CRISPR 等项目；
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具有较高的滴度和较好的稳定性；
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安全等级高（第三代系统中已删除大部分病毒复制相关基因）。
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