Q1:AAV 应该在什么温度下保存?
A:建议在 –80 °C 保存。
–80 °C 是目前公认最稳定的长期保存条件,可最大程度保持 AAV 的滴度和感染活性。不建议在 –20 °C 保存,长期放置容易导致活性下降。
Q2:AAV 冻存前需要特殊缓冲液吗?
A:需要合适的保存缓冲体系。
常用且稳定的冻存缓冲液包括:
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PBS 或 Tris 缓冲液(pH 7.2–7.5)
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可加入极低浓度的防吸附剂(如 Pluronic F-68)
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in vivo 或高要求实验中,可加入海藻糖(Trehalose)或低浓度甘油,提高冻融稳定性
不建议使用高盐、强表面活性剂或不明成分缓冲液。
Q3:AAV 是否可以反复冻融?
A:不建议反复冻融。
AAV 对冻融过程较为敏感,反复冻融会明显降低有效滴度和转导效率。建议在冻存前按单次使用量分装,解冻后一次性使用。
Q4:AAV 解冻时有什么注意事项?
A:建议快速解冻并轻柔操作。
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冰上快速解冻
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轻轻吹打混匀,避免剧烈震荡或涡旋
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解冻后的病毒建议当天使用完毕
Q5:AAV 冻存时需要使用特殊离心管吗?
A:建议使用低吸附(Low-binding)管。
普通塑料管可能导致 AAV 吸附在管壁上,从而降低实际可用滴度,尤其在低体积或高浓度条件下更为明显。
Q6:AAV 冻存不当会带来哪些影响?
A:可能导致以下问题:
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有效滴度下降
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转导效率降低
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批次间实验结果不稳定
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in vivo 实验效果不一致
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