慢病毒若不在低温条件下保存,会产生以下几方面的影响:
1. 病毒滴度降低
慢病毒在常温下保存会导致其滴度迅速下降。病毒滴度是指单位体积内具有感染能力的病毒颗粒数量。低温保存(如-80℃)可以有效维持病毒的结构完整性,而常温保存会使病毒颗粒的核酸和蛋白质结构逐渐降解。
每次冻融过程会降低病毒滴度约10%-20%,因此反复冻融是导致滴度下降的重要因素。
2. 病毒活性下降
慢病毒在常温下保存时,其感染能力会显著降低。这是因为病毒的蛋白质外壳和核酸在较高温度下更容易发生变性或降解。
例如,4℃保存的慢病毒建议在1-3天内使用完毕,超过一周其活性会显著下降。
3. 保存期限缩短
慢病毒在-80℃条件下可以保存6个月以上,甚至长达1年。然而,在常温下,其保存时间可能仅能维持数小时到数天。
如果需要短期保存(如3-5天),可以将病毒置于4℃,但超过一周后活性会显著降低。
4. 实验效果受影响
病毒滴度和活性的下降会直接影响实验结果。例如,在细胞感染实验中,低滴度的病毒可能导致感染效率低下,甚至无法达到预期的基因转导效果。
此外,反复冻融或不当保存还可能导致细胞状态变差,影响后续实验。
5. 经济损失
慢病毒的制备成本较高,若因保存不当导致病毒失效,不仅会浪费实验材料,还可能延误实验进度。
为了确保慢病毒的活性和实验的成功率,建议严格按照保存条件进行操作:短期保存(1-3天)可置于4℃,长期保存(6个月以上)需分装后置于-80℃。
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