1、基因过表达
原理:目的基因的CDS序列由载体转导到细胞内,并在载体上启动子的作用下转录表达
2、基因敲低
原理:将目的基因shRNA序列构建到病毒载体中,包装病毒后感染在体组织,在细胞内表达shRNA进而实现目的基因的表达沉默
3、基因敲除
原理: Cas9蛋白在sgRNA的引导下切断目的基因DNA序列,导致移码突变
病毒工具:AAVshH10-SpCas9, AAV shH10-sgRNA
作用效果:敲除Car2基因
注射方式:DBA/2J 小鼠, 玻璃体内注射,1 x 10^13 gc/mL, 2μL
检测时间:感染后1周