知识分享

1、基因过表达 原理：目的基因的CDS序列由载体转导到细胞内，并在载体上启动子的作用下转录表达 2、基因敲低 原理：将目的基因shRNA序列构建到病毒载体中，包装病毒后感染在体组织，在细胞内表达shRNA进而实现目的基因的表达沉默 3、基因敲除 原理： Cas9蛋白在sgRNA的引导下切断目的基因DNA序列，导致移码突变 病毒工具：AAVshH10-SpCas9, AAV shH10-sgRNA 作用效果：敲除Car2基因 注射方式：DBA/2J 小鼠, 玻璃体内注射，1 x 10^13  gc/mL, 2μL...

腺相关病毒（AAV，Adeno-associated virus）是一种常用于基因治疗的载体。 选择血清型需要考虑：目标细胞和组织类型（特异性）、注射方式（产量）、流行病学（预存抗体）等因素，因此选择合适的AAV血清型是成功实现基因治疗的关键 1、不同物种如何选血清型？ 2、不同组织如何选血清型？ 3、不同组织器官注射方式 组织 注射方式 血清型 脑部 脑立体定位注射 AAV9、AAV2、AAV5、AAV1、retro、BR1、BI30 尾静脉(静脉注射) AAV-PHP.eB、PG008、CAP-B10/B22、mac 心脏...

AAV在心脏研究中的应用案例案例1：抗精神病药物的心脏毒性研究1长期使用抗精神病药是导致心肌损伤甚至心源性猝死的常见原因。抗精神病药物的心脏毒性常导致停药或治疗中断。目前，关于抗精神病药物引起心脏毒性的具体机制尚不完全清楚，需要进一步的研究来阐明。 实验设计和主要研究结果：1. RNA 测序：NLRP3 炎症小体介导的细胞焦亡导致多种抗精神病药物的心脏毒性。2. 基于焦亡的小分子化合物筛选：大麻素受体 1 (CB1R)是NLRP3 炎性体的上游调节剂。3. CB1R的功能研究：敲除 Cb1r...

AAV（腺相关病毒）是基因治疗中常用的载体。AAV有多种血清型，不同的血清型对不同类型的细胞具有不同的感染能力和组织特异性。选择合适的AAV血清型是基因治疗中关键的一步。以下是常见的AAV血清型及其特点： AV血清型 主要靶向组织/器官 特点 常用领域 AAV1 骨骼肌、心脏、肺、中枢神经系统 对肌肉和心脏有较强感染能力，较适合高效基因传递。 肌肉、心脏、呼吸道相关疾病 AAV2 肝脏、眼睛、中枢神经系统 研究最广泛，感染范围广，但易受血清抗体影响，穿透效率一般。 眼科、中枢神经系统和肝脏疾病 AAV3 肝脏...

心脏疾病，如冠心病、心肌病、心律失常和心力衰竭等，严重威胁人类健康，是全球主要致死原因之一。随着基因治疗技术的发展，腺相关病毒（AAV）载体因其显著优势，已成为心脏疾病研究和治疗的关键工具。在应用AAV进行心脏疾病研究时，如何选择血清型、特异性启动子，确定注射方式和剂量以及取样时间，是研究者普遍关心的问题。本文将深入探讨这些问题，提供AAV病毒载体在心脏疾病研究中的设计和应用策略。靶向心脏的AAV血清型-病毒层面的设计策略AAV就像一座“货运飞船”，可以将货物（外源基因）运送至不同的靶细胞。血清型就是AAV这座“货运飞船”的系列号，不...

2023年6月28日，张锋团队（Makoto Saito和徐沛雨为论文共同第一作者）在 Nature 期刊发表论文【1】，在真核生物中发现了第一个RNA引导的DNA切割酶——Fanzor，更重要的是，这种新型CRISPR样系统，在真核生物中广泛存在，且具有独特的基因编辑潜力，可以在重编程后实现对人类基因组的编辑。相比CRISPR-Cas系统，Fanzor系统非常紧凑，更容易递送到细胞和组织中。而且，Fanzor系统没有旁系切割活性，可实现更精准的基因组编辑。 2024年8月28日，张锋团队（徐沛雨和Makoto...

2024年8月，环境化学与生态毒理学国家重点实验室彭汉勇课题组在CRISPR基因编辑工具开发方向取得新进展，研究成果以“RNA-activated CRISPR/Cas12a nanorobots operating in living cells ”为题发表在Journal of the American Chemical Society期刊上(Supplementary Cover)。...

近日，美国加州大学戴维斯分校直博毕业生、目前在美国斯坦福大学从事博士后研究的董春阳，联合开发一款新型基因编码荧光探针，为神经肽动力学研究提供了创新工具。据介绍，本次研究的核心思想在于：将荧光蛋白与阿片受体融合，通过受体构象变化引起的荧光信号变化，来实时地反映阿片肽的结合过程。期间，董春阳等人针对三种主要的阿片受体亚型——κ 受体、δ 受体和 μ 受体，分别设计了相应的荧光探针 κLight、δLight 和 μLight。这样一来，不仅可以区分不同类型的阿片肽，还能在单个细胞水平上实现高时空分辨率的信号检测。...

国家纳米科学中心方英和田慧慧研究团队在基于生物编辑技术的脑机接口增强技术方面取得新进展，相关成果以Spatially Precise Genetic Engineering at the Electrode-Tissue Interface为题，发表在Advanced Materials上。...

CRISPR/Cas9系统自发现以来，得到快速发展已被广泛应用生命科学基础研究、基因治疗、动植物育种改良等领域。基于Cas9切口酶（nCas9）与脱氨酶结构域/糖基化酶（MPG或UNG）的融合成的碱基编辑器（ABE、CBE、gGBE、gTBE），可高效实现A-to-G、C-to-T、C-to-G、G-to-C/T，以及T-to-G/C的碱基替换，为纠正突变的疾病位点提供了精准高效基因编辑工具。然而由于Cas9的体积过大（1368个氨基酸），基于nCas9的碱基编辑器难以实现单个AAV的包装递送（极限为4.7kb），极大限制了在体基因编...