不同温度对AAV病毒保存效果的影响如下:
常温保存:AAV病毒在常温(20-25°C)下的稳定性较差,更适合在低温条件下保存。病毒浓度越高,在常温下的存储时效性可能相对较长。使用适当的缓冲液和添加保护剂(如甘油或蔗糖)可以提高AAV病毒在常温下的稳定性。
4°C短期保存:如果在短时间内(3天内)将使用AAV病毒进行实验,可以将病毒暂时放置于4°C保存。病毒当天未用完但明天会接着用,可直接4°C保存过夜,因为-80°C保存会增加冻融次数严重影响AAV滴度。
-80°C长期保存:AAV病毒最适合保存在超低温条件下,通常是零下80°C或更低的超低温冰箱中。这有助于防止病毒颗粒的降解和保持其活性。在这种极低温环境下,病毒的核酸和蛋白质结构相对稳定,能够长时间保持功能性。病毒可以存放于-80°C 6个月以上;但如果病毒储存时间超过6个月,建议在使用前需要重新测定病毒滴度。
反复冻融的影响:每冻融一次,病毒滴度降低10%左右,应避免反复冻融。因此,建议收到病毒后按照每次的使用量进行分装,然后冻存于-80°C,以减少反复冻融对病毒活性的影响。
液氮罐超低温保存:对于长期保存,建议在液氮罐中存放,温度可达到-196°C,能够有效延长病毒的存活时间。
冻干保存:通过冻干技术将病毒干燥后保存,可以在常温下储存,但需要确保冻干过程不会影响病毒的活性。
保护剂的添加:在储存过程中,可以考虑添加一些保护剂,如甘油或蔗糖,以帮助防止病毒颗粒在冰冻过程中受到损害。
AAV病毒在不同温度下的保存效果受到多种因素的影响,包括病毒浓度、缓冲液、保护剂等。为了最大程度地保持AAV病毒的稳定性和活性,推荐在-80°C或更低温度下进行长期保存,并尽量避免反复冻融。