包装质粒会显著影响慢病毒生产中的滴度水平和转染效率。由包装质粒编码的各种元件的适当平衡和功能对于慢病毒颗粒的成功组装和包装是必要的。
1、质粒比例:调整三种质粒(转移载体、包装质粒和包膜质粒)的比例,以找到高滴度生产的最佳组合。每个质粒的相对量会影响慢病毒包装的效率。
2、启动子强度:使用强且调节良好的启动子来表达必需病毒蛋白(Gag、Pol、Rev、Tat),以确保稳定和高效的慢病毒生产。
3、细胞系:选择具有有利于慢病毒生产的特性的合适包装细胞系。在包装慢病毒时使用 HEK-293T 细胞系。有许多细胞系选择。
4、质粒 DNA:用于转染的质粒 DNA 的纯度和完整性非常重要。