1.腺相关病毒(AAV)的装载容量
AAV（腺相关病毒）的装载容量主要由其基因组长度限制，约为 4.7 kb（kilobases），这是AAV病毒颗粒可以容纳的DNA总长度，包括病毒的反向末端重复序列（ITR）和目标序列。
总容量：AAV的基因组长度为4.7 kb，其中ITR序列（每端约145 bp）占据了一部分空间。因此，实际用于插入外源基因的空间大约是 4.4-4.5 kb。
超过装载容量时的情况：如果插入的外源基因长度超过4.7 kb，AAV包装过程会变得不稳定，可能导致病毒颗粒无法正常组装或产生不完整的基因组。
一些策略可以扩展装载容量，比如双载体策略（split AAV）：将大于4.7 kb的基因分割成两部分，通过两个AAV载体分别传递，随后在宿主细胞中利用重组或转录后拼接来恢复完整的基因。
优化策略：如果目标基因较大，可以选择去除不必要的调控序列（如非关键的启动子或增强子）。或者，使用AAV与其他病毒载体（如腺病毒或慢病毒）的组合来克服装载限制。
2.AAV可以整合到宿主基因组中吗？
腺相关病毒（Adeno-associated virus, AAV）在正常情况下并不会高频地整合到宿主基因组中。它主要以非整合的外源基因组形式（episomal DNA）存在于宿主细胞核内。这是AAV在基因治疗中被广泛应用的原因之一，因为它可以降低因插入突变而导致副作用的风险。
然而，AAV也存在一定条件下整合到宿主基因组中的可能性，但频率较低。具体情况包括：
野生型AAV：野生型AAV在感染宿主时可能会整合到人类染色体19的特定位点（AAVS1位点），这是因为它的反向末端重复序列（ITR）具有位点特异性整合的能力。
这种整合依赖于AAV的Rep蛋白，它能够介导病毒基因组与宿主基因组的结合。
基因治疗中使用的重组AAV（rAAV）：基因治疗中常用的rAAV去除了Rep基因，因此它们几乎不会特异性整合到宿主基因组中，更倾向于以外源DNA形式存在。
尽管如此，研究发现，rAAV也有极低概率随机整合到宿主基因组中，尤其是在宿主基因组发生DNA损伤或双链断裂（DSB）时。
AAV整合到宿主基因组中的可能性取决于病毒的类型（野生型或重组型）和宿主细胞的状态。对于基因治疗应用来说，使用的rAAV设计旨在最小化整合风险，以提高安全性。