一般来说,慢病毒滴度检测通过流式细胞术染色后,样本的保存时间会影响检测结果的准确性。以下是一些需要注意的关键点:

1.细胞状态:流式细胞术依赖细胞的活性或形态特征。如果染色后的细胞已经放置较久,可能会出现细胞死亡、荧光信号减弱或背景噪音增加,从而影响检测结果。

2.荧光信号稳定性:不同荧光染料的稳定性不同。有些荧光染料在长时间存放或暴露于光线中会发生光漂白(Photobleaching)或信号衰减。如果信号显著减弱,检测的灵敏度和准确性可能受到影响。

3.保存条件:染色后的样本保存条件至关重要。如果在4°C避光条件下短时间保存(如1-2天),荧光信号可能仍然可靠。但如果时间过长(例如超过一周),信号强度可能显著降低,导致数据不准确。

4.实验目的:如果是为了精确测定慢病毒滴度,建议尽快进行流式检测。如果因为特殊情况导致样本存放时间过长,最好通过预实验或对照实验验证信号强度和稳定性。

建议:

尽快检测:染色后样本的最佳检测时间通常是当天或次日。

保存条件优化:在染色后尽量将样本避光保存于4°C。

重新检测:如果样本放置时间过久且信号减弱,建议重新进行病毒感染和染色流程。

如果放置时间不长(1-2天),可以尝试检测,但需要注意对照组信号是否仍正常。如果放置时间过久,结果的可信度可能较低,建议重新准备样本。